アポトーシスを可視化するマウスの開発とその応用

细胞凋亡可视化小鼠的研制及其应用

• 批准号: 21659076
• 负责人: 清水 重臣
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21659076/
• 关键词: アポトーシス; ミトコンドリア; カスペース; Smac; Bc1-2; 蛋白質スプライシング

生体において、アポトーシスは生理学的,病理学的に極めて重要な役割を担っていると考えられている。しかしながら、生体内において、アポトーシスがいつ、どのような臓器で、どのような生理機能に関わっているか,疾患のどの場面で細胞死が関与しているかは、充分には解明されていない。我々は、このような課題を克服し、生体におけるアポトーシスの意義をより明確にする為に、アポトーシスをモニターできるマウスを作製し、種々の遺伝子改変マウスとの交配を行った。具体的には、まず、(1)アポトーシス実行に不可欠の現象である「ミトコンドリアの膜透過性亢進」を時空間的に定量評価できるマウス、(2)アポトーシス実行に直接関わる蛋白質分解酵素カスペースの活性化をモニターできるマウス、の2種類を作成した。前者は、ミトコンドリア膜を赤色蛍光でラベルし、膜間腔に存在するSmac蛋白質に緑色蛍光を付加したマウスで、赤色と緑色の解離によって膜透過性変化がモニターできる。後者は、split GFPを用いてカスペース活性を定量評価できるマウスである。後者に関しては,蛍光蛋白質が充分には発現せず、モニターマウスとしては充分ではなかった。一方、ミトコンドリア膜透過性をモニターするマウスに関しては、(1)マウス由来の線維芽細胞にアポトーシス刺激を加えると、刺激の多寡に応じて蛍光活性が認められる事、(2)アポトーシス抑制分子であるBc1-2を過剰発現したマウスと交配すると、蛍光活性が認められなくなる事、の2点より、アポトーシスモニターマウスとして有用である事が示された。さらに、このマウスを用いて、発生期にアポトーシスが生じている部位を観察したところ、指間の細胞や胸腺細胞においてアポトーシスが生じている事が明らかとなった。

The biological and pathological aspects of physiology and pathology are important. Physiological functionsに关わっているか, Disease のどのcene でcell death が关与しているかは, fully にはclear されていない. I 々は、このようなprojectをovercomeし、生生におけるアポトーシスのmeaningをよりclearにする为に、アポトーシスをモニターできるマウスを做し, kind of 々の缝子Changed変マウスとのMATINGを行った. Specific details: (1) Quantitative evaluation of the time and space phenomenon of "manufacturing membrane permeability enhancement" MASUS, (2) アポトーシス実行に is directly related to わるproteolytic enzyme カスペースのactivated をモニターできるマウス, の2 kinds of をした. The former is the presence of the ミトコンドリアmembrane をred 荍光でラベルし and the presence of the intermembrane space するSmac protein にgreen The color is light, the color is added, the color is red and the green is dissociated, and the membrane permeability is changed. In the latter case, the activity of split GFP was quantitatively evaluated using the activity of split GFP. The latter is に关しては, 荍光protein が全には発appears せず, and モニターマウスとしては fully ではなかった. One side, ミトコンドリア membrane permeability をモニターするマウスに关しては, (1) マウス origin no line dimension The bud cells are stimulated by the stimulation of the cells, and the stimulation of the cells is stimulated by the light activity of the cells, (2)アポトーシス inhibitory molecule であるBc1-2 したマウスと mating すると, 荍photoactivity がidentificationられなくなる事, の2点より, アポトーシスモニターマウスとして Useful である事が说された.さらに、このマウスを用いて、発生期にアポトーシスが生じている PART を観看したところ、 interdigital thymocyte においてアポトーシスが生じている事が明らかとなった.

项目成果

The role of Cyclophilin D in learning and memory

• DOI: 10.1002/hipo.20625
• 发表时间: 2009-05
• 期刊: Hippocampus
• 影响因子: 3.5
• 作者: A. Mouri;Y. Noda;S. Shimizu;Y. Tsujimoto;T. Nabeshima

Preparation of Connexin43-Integrated Giant Liposomes by a Baculovirus Expression Liposome Fusion Method

• DOI: 10.1002/bit.22845
• 发表时间: 2010-12-01
• 期刊: BIOTECHNOLOGY AND BIOENGINEERING
• 影响因子: 3.8
• 作者: Kamiya, Koki;Tsumoto, Kanta;Akiyoshi, Kazunari
• 通讯作者: Akiyoshi, Kazunari

Multiple mechanisms of cell death and their regulation by mitochondria

细胞死亡的多种机制及其线粒体的调节

• 发表时间: 2010
• 作者: 大島浩子;大島正伸;S.Shimizu
• 通讯作者: S.Shimizu

p53 Inhibits Vascular Endothelial Growth Factor Expression in Solid Tumor.

p53 抑制实体瘤中血管内皮生长因子的表达。

• DOI: 10.1016/j.jss.2010.12.028
• 发表时间: 2012
• 期刊: Journal of Surgical Research
• 影响因子: 2.2
• 作者: Tsuchiyama A.;Ebihara M.;Kimura M.;Kitajima F.;Kotsugi M.;Itoh S.;Nagao K.;Nakamura T.;Naraoka H.;Noguchi T.;Okazaki R.;Uesugi K.;Uesugi M.;Yurimoto H.;Ireland T.R.;Sandford S.A.;Zolensky M.;Fujimura A.;Abe M.;Yada T.;Mukai T.;Okada T;Yasuhiko Yoshioka
• 通讯作者: Yasuhiko Yoshioka

Delayed-Onset Caspase-Dependent Massive Hepatocyte Apoptosis upon Fas Activation in Bak/Bax-Deficient Mice

• DOI: 10.1002/hep.24305
• 发表时间: 2011-07-01
• 期刊: HEPATOLOGY
• 影响因子: 13.5
• 作者: Hikita, Hayato;Takehara, Tetsuo;Hayashi, Norio
• 通讯作者: Hayashi, Norio