Struktur und Funktion von Komponenten der bakteriellen Signaltransduktion und ihre Interaktion mit Proteinen und Proteindomänen des bakteriellen Phosphotransferasesystems

细菌信号转导成分的结构和功能及其与细菌磷酸转移酶系统的蛋白质和蛋白质结构域的相互作用

• 批准号: 5390947
• 负责人: Professor Dr. Wolfgang Hengstenberg
• 金额: --
• 依托单位: Arbeitsgruppe Physiologie der Mikroorganismen
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2001-12-31 至 2003-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5390947?language=en
• 关键词: Struktur; und; Funktion; von; Komponenten

Inzwischen ist die Beteiligung des PTS an der bakteriellen Signaltransduktion klar gezeigt worden. Von besonderem Interesse ist dabei die überwiegend in grampositiven Bakterien vorkommende bifunktionelle HPr-Kinase/Phosphatase, die das Phosphocarrierprotein HPr an Serin 46 ATP-abhängig phosphoryliert. Einerseits wird dadurch die Phosphorylierung von HPr durch die Histidinkinase Enzym I des PTS stark gehemmt und damit die Aufnahme von PTS-Zuckern eingeschränkt. Andererseits bildet P-Ser-HPr mit dem Catabolite Control Protein CcpA einen Komplex, der an cre-DNA-Sequenzen bindet, die katabolischen Operons vorgelagert sind. Dies bewirkt Katabolitrepression in grampositiven Bakterien. Die Struktur der HPr-Kinase aus Staphylococcus xylosus konnte in Zusammenarbeit mit Dr. Klaus Scheffzek, EMBL Heidelberg, gelöst werden. Danach wird die Kristallisation von Komplexen aus HPr und HPr-Kinase und aus ATP-Analogen mit HPrkinase versucht. Begleitend zu Strukturuntersuchungen soll die Substratspezifität der HPrkinase durch kinetische Messungen analysiert werden. Die Proteinkomponenten des Glukonat-spezifischen PTS, das bisher nur in Enterococcus faecalis nachgewiesen wurde, lassen sich gut heterolog überexprimieren. Mit Glukonat-spezifischem Enzym IIA konnten bereits Kristalle erhalten werden, die bis 3Å streuen (Zusammenarbeit mit B. Dijksta, Groningen, NL). Die Glukonat-spezifische IIB-Domäne bildet mit der IIA-Domäne einen stabilen Komplex, der strukturell weiter charakterisiert werden soll. In Zusammenarbeit mit dem Proteinstrukturlabor Prof. Dr. H.E. Meyer werden massenspektrometrische Verfahren zur sequenzspezifischen Zuordnung von Phosphohistidinresten in Proteinen ausgearbeitet.

这是PTS和信号传输的一个非常复杂的沃登。因此，在嗜中性白细胞中，HPr-激酶/磷酸酶是一种双功能的磷酸化载体蛋白，即HPr和丝氨酸46 ATP-磷酸化酶。通过PTS的组胺激酶I，HPr的磷酸化作用将消失，并导致PTS-Zuckern的Aufnahme死亡。P-Ser-HPr与分解代谢控制蛋白CcpA形成一个复合物，通过DNA测序结合，分解代谢操纵子是有效的。在语法阳性的Bakterien中死亡是由于分解代谢抑制。由Klaus Scheffzek博士在德国海德堡韦尔登欧洲生物医学实验室研究木糖葡萄球菌HPr激酶的结构。结果表明，HPr和HPr激酶以及含HPr激酶的ATP类似物的复合物发生结晶。通过韦尔登分析，开始结构化处理以解决HPr激酶的底物特性问题。葡糖酸特异性PTS的蛋白质组分，在粪肠球菌中是唯一的，它使肠道异源性增强。Glukonat-specifischem Enzyme IIA可使Kristalle产生韦尔登，二次流（Zusammenarbeit mit B. Dijksta，Groningen，NL）。Glukonat-speciziethe IIB Domäne bildet mit der IIA Domäne einen stabilen Komplex，der strukturell weiter charakterisiert韦尔登soll.在Zusammenarbeit mit dem Proteinstrukturlabor教授博士H. E. Meyer韦尔登质谱法用于蛋白质中磷酸化组氨酸的测序。