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口腔常在細菌の網羅的解析による川崎病特異的口腔フローラの解明

通过综合分析口腔常驻细菌阐明川崎病特异性口腔菌群

基本信息

批准号：
21659486
负责人：
山下喜久
金额：
$ 1.98万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21659486/
关键词：
川崎病口腔細菌叢 T-RFLP クラスター分析

项目摘要

九州大学病院小児科およびその共同研究施設を受診し、川崎病の診断を受けた乳乳幼児の患者群40名と健常者のコントロール群21名およびDiseaseコントロール群4名の計65名について口腔内の診査を行い、口腔粘膜状態を調べた後にシードスワブ1号で口腔細菌を含む咽頭拭い液および舌苔を採取した。採取した咽頭拭い液および舌苔から細菌のDNAを抽出してテンプレートとし、16S rRNA遺伝子を標的にして6-FAMおよびHEX蛍光標識ユニバーサルプライマーを用いてPCRで増幅した。増幅した遺伝子断片はHaeIIIで切断した後、キャピラリー電気泳動によってT-RFLPパターンを得た。得られたT-RFLPパターンについては、ソフトフェアー開発業者と共同開発した計算プログラムを用いて、各サンプルに存在する口腔細菌種の種類とその割合を計算した。計算プログラムから算出された各サンプルに存在する細菌種の構成比を基に、患者とコントロール群の全サンプルの細菌叢パターンのクラスター分析を行った。パターン解析には階層クラスター分析であるWard法を採用した。この結果、川崎病の患者と健常者のT-RFLPパターンには偏りがあり、健常者が多く集まるクラスターと川崎病患者が多く集まるクラスターが存在した。しかし、その年齢構成を調べると、患者が多く集まったクラスターには1.5歳未満の者がほとんどを占めており、患者の多いクラスターには1.5歳以上の者が多くを占めていた。このことから、川崎病患者に偏っていた細菌叢の構成には年齢による口腔環境の変化が影響していることが考えられる。その一方で、1.5歳以上の者が多いクラスターでは、健常者が多いものの、細菌叢の偏りによって、川崎病の多いサブクラスターに分類することができたことから、口腔細菌叢の構成の違いと川崎病の発症に関連性があることが示唆された。今後は、被験者数を増やすことで今回得られた傾向について統計学的な有意差を明らかにしていく必要性が認められた。

Kyushu University Hospital, Department of Primary Medicine, Kyushu University Hospital, Department of Primary Medicine, Department of Medicine, Kyushu University Hospital, Department of Primary Medicine, Kyushu University Hospital, Kyushu University Hospital After the oral mucous membrane, the number 1 oral cavity bacteria contains pharynx swab fluid, tongue coating and tongue coating. Take the pharynx swab fluid, the tongue coating, the fungus, the DNA, the 16s rRNA, the 6-FAM, the HEX, the PCR, the frame. After the HaeIII was cut off, the swimming exercise was successfully performed and the T-RFLP was successfully cut. It is necessary to use the T-RFLP information system, the operator, the operator and the operator. It is calculated that there is a ratio of bacteria to bacteria in each hospital, and that the patients do not have any bacterial species in the whole population. Please analyze the Ward method and use it. The results showed that the patients with Kawasaki disease had T-RFLP disease and the patients with Kawasaki disease had multiple symptoms. The patients were divided into two groups: the number of patients, the number of patients. Patients with Kawasaki disease and patients with Kawasaki disease are infected with bacteria and bacteria. The oral environment changes every year. For those who are over 1.5 years old, those who are over 1.5 years old, those who are normal, those who are more than 1.5 years old, the patients who are more than 1.5 years old, the patients who are over 1.5 years old, the patients who are more than 1.5 years old, the patients who are more than 1.5 years old, the patients who are over 1.5 years old, the patients who are In the future, the number of people who have been killed in the future has received an intentional error in the statistics of the number of people who have been killed in the future.