う蝕細菌のバシトラシン耐性機構の解明

致龋菌对杆菌肽耐药机制的阐明

• 批准号: 12877339
• 负责人: 山下 喜久
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Nihon University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12877339/
• 关键词: う蝕細菌; Streptococcus mutans; バシトラシン耐性; 抗生物質

う蝕細菌として最も注目されているStreptococcus mutansはバシトラシン耐性を示すが、その耐性機構については全く不明である。そこで本研究では、本細菌のバシトラシン耐性に関与する遺伝子を特定するため以下の操作を行った。まず、野生株であるXc株の染色体遺伝子をSau3AIで完全消化し、S.mutans内で複製できないプラスミドpResEmBBNに組み込んだクローンバンクを作製した。このクローンバンクでXc株の形質転換を行い、得られた形質転換株をバシトラシンを含む寒天培地と含まない寒天培地のそれぞれに接種し、バシトラシン感受性の変異株を選択した。この結果得られた変異株の染色体遺伝子中のプラスミド挿入部位をマーカーレスキュー法で単離した。単離した遺伝子の塩基配列を決定した結果、この部位には6つのopen reading frame(ORF)が認められた。最上流のORFは既知のgtfC遺伝子であり、下流の遺伝子をそれぞれ順にORF1,ORF2,ORF3,ORF4,ORF5と名付けた。各遺伝子を失活した変異株を作製したところ、ORF1,ORF2,ORF3,ORF4のいずれの遺伝子を失活してもバシトラシン耐性が低下したことから、これらはいずれもバシトラシン耐性に関与する可能性が示唆された。一方、ORF5を失活してもバシトラシン耐性の低下は認められなかった。相同性検索の結果、ORF1,ORF2はABC transport system ORF3,ORF4はtwo-component regulatory systemの構成因子と高い相同性を示した。以上の結果から、S.mutansのバシトラシン耐性にはABC transport systemおよびtwo-component regulatory systemが関与していると考えられる。

う corrosion bacteria と し て favorite も さ れ て い る Streptococcus mutans は バ シ ト ラ シ ン patience を shown す が, そ の patience institutions に つ い て は く all unknown で あ る. そ こ で this study で は, the bacteria の バ シ ト ラ シ ン patience に masato and す る posthumous son 伝 を specific す る た め の under operating line を っ た. ま ず, wild strains で あ る Xc strains の chromosome heritage 伝 son を Sau3AI で digested し, S.m utans で replication で き な い プ ラ ス ミ ド pResEmBBN に group み 込 ん だ ク ロ ー ン バ ン ク を cropping し た. こ の ク ロ ー ン バ ン ク で Xc strains の form quality planning in line を い, ら れ た form quality planning in plant を バ シ ト ラ シ ン を containing む sees the petty と containing ま な い sees the petty の そ れ ぞ れ に vaccination し, バ シ ト ラ シ ン susceptibility の - different strains を sentaku し た. こ の results have ら れ た - traces of different strains の chromosome 伝 of の プ ラ ス ミ ド scions into parts を マ ー カ ー レ ス キ ュ ー method で 単 from し た. 単 from し た posthumous son 伝 の salt base with column を decided し た results, こ の parts に は 6 つ の open reading frame (ORF) が recognize め ら れ た. The best の ORF は already know の gtfC posthumous son 伝 で あ り, obscene の heritage 伝 son を そ れ ぞ れ shun に ORF1 and ORF2, ORF3, ORF4, ORF5 と name pay け た. The heritage 伝 son を inactivation し た - different strains を cropping し た と こ ろ, ORF1 and ORF2, ORF3, ORF4 の い ず れ の heritage 伝 son を inactivation し て も バ シ ト ラ シ ン low patience が し た こ と か ら, こ れ ら は い ず れ も バ シ ト ラ シ ン patience に masato and す が る possibility in stopping さ れ た. On one side, ORF5を inactivated て バシトラシ バシトラシ <s:1> patient <s:1> low recognized められな った った った. The similarity of 検 cable test results, ORF1,ORF2 と ABC transport system ORF3,ORF4 <s:1> two-component regulatory system <s:1> composition factor と high <s:1> similarity を indicates <s:1> た. The above <s:1> results バシトラシ ら, s. mutans バシトラシ バシトラシ <s:1> tolerance に <e:1> ABC transport systemおよびtwo-component regulatory systemが are related to <s:1> て ると ると ると えられる えられる.