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複合体X線解析で解明する葉緑体内還元力分配システムの構造基盤

复杂X射线分析阐明叶绿体内还原配电系统的结构基础

基本信息

批准号：
21687008
负责人：
栗栖源嗣
金额：
$ 14.56万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (A)
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2011
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度も,複合体構造解析で解明を目指す電子伝達分配システムの内,主にクロロフィル合成の鍵酵素であるフェレドキシン依存性の暗所作動型プロトクロロフィリド還元酵素(DPOR)に的を絞って主に変異体構造解析を遂行した。その結果,DPORの触媒コンポーネントのうちBchBのC末端ヘリックスの中ほどにあるMet408をAlaに置換した変異体で、これまでは結晶中で電子密度を確認することのできなかったC末端ドメイン(約70残基)を電子密度中に確認することができた。今回初めて構造決定したC末端ドメインの構造は全く新しいフォールドをもつ小型の球状ドメインで非常に特徴的な表面電荷分布をとっていた。具体的には,正に帯電した領域を多く持ち,基質のクロロフィル前躯体がもつ負の電荷と非常によい相補性を示していた。基質取り込み機構に密接に関与している可能性を指摘することができたので、引き続き機能解析と併せて研究を推進していく。また,電子伝達コンポーネントであるBchLとフェレドキシンとの複合体構造解析を目指した試料調製も行っているが,現在までのところ安定にBchLタンパクを取ることが出来ず,結晶化には至っていない。並行して、フェレドキシンへ還元電子を伝達する光化学系I反応中心とフェレドキシンとの結晶化条件の検討を行なっている。光化学系I反応中心単独の結晶化においても精製ロット差が大きく,安定して良質な結晶を得ることが出来ていないので,引き続き精製の再現性を中心に研究を展開していく。

This year, the structure analysis of the complex has been clarified, and the key enzymes used in the synthesis of key enzymes have been analyzed within the electronic distribution system. Analyzes of the structure of the allotype of the キシン-dependent dark action type DPOR enzyme (DPOR) were carried out.そのRESULTS,DPORのcatalystコンポーネントのうちBchBのC terminal ヘリックスの中ほどにあるMet408をAlaにreplacement した変variantで、これまではConfirmation of the electron density in the crystal The terminal residue (approximately 70 residues) has a medium electron density and is confirmed to be the same. The structure of the first chapter of this chapter is determined by the C-end structure of the new chapter. It is a small spherical ball with a very special surface charge distribution. Specifically speaking, the positive and negative electric charges are very strong and the complementary properties of the basic materials are very strong. The substrate is closely connected to the mechanism and the possibility is pointed out, and the functional analysis and analysis of the function are combined and the research is promoted.また, Electron denda コンポーネントであるBchL とフェレドキシンとの complex structure analysis を Eye finger した sample preparation もOK っているが, now までのところstable にBchL タンパクをtake ることが out ず, crystallized には to っていない. Department of Photochemistry I Reverse Electronics応中心とフェレドキシンとのCrystallization Conditionsの検questionを行なっている. Department of Photochemistry I Reaction Center Single Crystallized Crystal Refined Polymer Crystal を got ることが came out ていないので, citation き続き refined の reproducibility を center に research を unfolded していく.