転写因子AP－1と細胞表面受容体Ephによる骨形成制御機構の解析

转录因子AP-1与细胞表面受体Eph的骨形成调控机制分析

• 批准号: 11J05156
• 负责人: 入江 奈緒子
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11J05156/
• 关键词: 骨代謝; 骨石灰化; 骨芽細胞; エフ受容体

本研究課題では受容体型チロシンキナーゼEphA2による骨石灰化制御機構解明を目指し、EphA2欠損マウスやEphA2阻害剤、compound1(com1)と2(com2)を用いた。EphA2欠損マウスは対照群に比べ骨量が増加しており、未石灰化骨である類骨量が有意に減少していることから、EphA2欠損による骨石灰化亢進が考えられた。そこで成体長管骨培養系を樹立し、EphA2阻害剤を加えたところわずか24時間以内にcom2存在下において、72時間後にはcom1とcom2の両者において、2次海綿骨密度が増加した。骨密度増加にともない培養液中のCa濃度が減少した。またCa指示薬カルセインの骨基質への取り込みが対照群に比べ増加した。カルセインラベル表面には活性型骨芽細胞が観察された。以上より、EphA2シグナル抑制により急速な骨石灰化が起こると考えられた。そこで、in vitroで分化誘導したマウス頭蓋骨由来成熟骨芽細胞に3日間EphA2/4阻害剤を加えたところ、濃度依存的にカルシウム沈着の亢進が認められた。EphA2欠損またはEphA2阻害剤添加後の骨芽細胞では、Caやリンを取り込み、ハイドロキシアパタイト結晶生成の場である基質小胞が対照群より大きい事を電子顕微鏡により観察した。また、flow cytometryにより大きな基質小胞ではALPの活性が増加した。現在、これらの研究成果をまとめた論文を国際科学雑誌に投稿している。また、平成23年度より、イギリス、ケンブリッジ大学Gurdon研究所のAzim Surani博士の研究室に訪問し、細胞の分化と転写制御をこれまでとは別の視点から据えるべく、生殖細胞の発生・分化に着目し研究を行っている。

This research topic is about the understanding of bone calcification control mechanism, EphA2 deficiency, EphA2 inhibitor, compound1(com1) and compound 2(com2). EphA2 deficiency is due to increased bone mass, decreased bone mass due to uncalcified bone mass, increased bone calcification due to EphA2 deficiency. The density of sponge bone increased within 24 hours in the presence of com2, 72 hours later in the presence of com1 and com2. As bone density increases, the Ca concentration in the culture medium decreases. Ca indicates that the bone matrix of the tissue is more sensitive to light than to light. The active bone bud cells were observed on the surface of the cells. The above, EphA2 In vitro differentiation is induced by mature bone bud cells. In vitro differentiation is induced by EphA2/4 inhibitor. In vitro differentiation is induced by EphA2/4 inhibitor. EphA2 deficiency is observed in the presence of EphA2 inhibitors in bone bud cells, in the presence of Ca 2 + and in the presence of electron microscopy in the field of crystallization. The activity of ALP in matrix cells increased due to the increase in flow cytometry. Now, the research results are published in the International Journal of Science. Visit to Dr. Azim Surani's Laboratory, Gurdon Research Institute, Heisei University, 2013. Research on cell differentiation and reproductive control.