Strukturelle und proteinbiochemische Charakterisierung des Uhrenproteins Period

时钟蛋白的结构和蛋白质生化特征

基本信息

项目摘要

Säugetiere und Insekten besitzen tagesperiodische Aktivitätszyklen, so genannte zirkadiane Rhythmen, welche durch innere Uhren erzeugt und mit dem 24h-Tag-Nacht-Zyklus der Umwelt synchronisiert werden. Der 24h Rhythmus wird durch spezifische Protein-Protein- und Protein-DNA-Interaktionen sowie durch tagesperiodisch regulierte posttranslationale Modifikationen, zelluläre Lokalisation, Expression und Abbau von Uhrenproteinen erzeugt. Um ein detailliertes Verständnis dieser molekularen Prozesse zu gewinnen, sollen als Hauptziel des beantragten Forschungsvorhabens die 3D-Strukturen der Uhrenproteine Maus-Period 1 und 2 (mPer1 und 2) und Drosophila-Period (dPer) mittels Röntgenkristallographie bestimmt werden. Zusätzlich sollen Oligomerisierung und Protein-Protein-Interaktionen der Periodproteine durch Gelfiltration, Dynamische Lichtstreuung, Pull-Down-Experimente und Oberflächen-Plasmon-Resonanz untersucht werden. Phosphorylierungsstellen der Kasein Kinase Iepsilon in Maus-Period 1 und 2 sollen mit Hilfe von Massenspektroskopie lokalisiert und der Einfluss der Phosphorylierung auf die Molekülkonformation durch CD-Spektroskopie untersucht werden.
Säugetiere 和 Insekten besitzen besitzen periodische Aktivitätszyklen, so genannte zirkadiane Rhythmen, welche durch inere Uhren erzeugt und mit dem 24h-Tag-Nacht-Zyklus der Umwelt Synchronisiert werden.特定蛋白质和蛋白质 DNA 相互作用的 24 小时节律在翻译后修饰、区域化、表达和 Uhren Proteinen erzeugt 的周期调节中。我们详细介绍了分子研究进展,以及 3D-Strukturen der Uhren Proteine Maus-Period 1 和 2 (mPer1 und 2) 和 Drosophila-Period (dPer) mittels Röntgenkristallographie 的 Hauptziel des beantragten Forschungsvorhabens Forschungsvorhabens 最好的韦尔登。在凝胶过滤、动态光照、下拉实验和上层等离激元共振中解决了周期性蛋白质寡聚和蛋白质-蛋白质相互作用问题。在 Maus 周期 1 和 2 中,Kasein 激酶 Iepsilon 的磷酸化过程将在 CD-Spektroskopie 下的分子结构中进行。

项目成果

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