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乳酸菌が接着する細胞膜糖鎖とその受容体タンパク質に関する研究

乳酸菌粘附的细胞膜糖链及其受体蛋白的研究

基本信息

批准号：
07660108
负责人：
山本憲二
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

近年、多くの病原性細菌が宿主の細胞の膜表面に存在する糖タンパク質や糖脂質の糖鎖をエピトープとして細胞に付着し、感染することが知られるようになってきた。我々は腸内細菌のなかでもヒトの腸管内で腸内フローラの形成や整腸作用などの有用な働きをすることが知られている乳酸菌(Lactobacillus属)の細胞への付着に糖鎖が関与しているのかどうかなどについて検討した。Lactobacillus属乳酸菌と糖脂質糖鎖との結合は酵素免疫測定法を用いて調べた。先ず、Lactobacillus casei菌体をウサギに皮下注射し、得られた血清よりL.casei抗体(IgG)を精製した。次に、さまざまな糖脂質を薄層プレートに固定し、これに菌体を加えた後、抗L.casei抗体を添加し、次いで抗ウサギIgG抗体を二次抗体として添加して、免疫染色試薬によりL.caseiが結合する糖脂質を検索した。その結果、中性糖脂質であるGA1や比較的糖鎖の短い糖脂質であるCTH(Ceramide trihexoside)、Lactosylceramide、 Galactosylceramideなどに本菌が結合することがわかった。しかしながら、シアル酸を含む酸性糖脂質には全く結合せず、シアル酸の存在は乳酸菌の接着を阻害すると考えられる。ガングリオシドGM1をシアリダーゼで処理すると、反応時間とともにGA1が生成され、L.caseiの結合も見られるようになった。また、Globosideにβ-N-Acetylhexosaminidaseを作用させるとCTHが生成するとともにL.caseiの結合が見られた。以上の結果より、本菌は糖鎖の非還元末端がガラクトースである中性の糖脂質に特異的に結合することが示唆された。本菌はCTHとGA1に最も良く結合した。そこで、ラットの小腸粘膜を酸性糖脂質と中性糖脂質に分画抽出して、それぞれの画分の糖脂質についてL.caseiとの結合を調べたところ、中性糖脂質画分にのみいくつかのポジティブな糖脂質が見出された。一方、糖鎖と結合するL.caseiの膜受容体について調べたところ、熱に非常に強いタンパク質あるいはペプチドであることが示唆された。

In recent years, many pathogenic bacteria exist on the membrane surface of host cells, such as sugar, lipid and sugar chains. We are concerned about the role of intestinal bacteria in the formation and regulation of intestinal function in the intestinal tract, and we know that lactic acid bacteria (Lactobacillus) cells in the intestinal tract are closely related to sugar lock. Lactobacillus belongs to lactic acid bacteria, sugar lipid sugar chain and enzyme immunoassay. First, Lactobacillus casei cells were injected subcutaneously, and then the serum was purified. The second is the addition of anti-L. casei antibody after the addition of anti-L. casei antibody. The second is the addition of anti-L.casei IgG antibody after the addition of anti-L. casei antibody. The third is the addition of anti-L.casei antibody after the addition of anti-L. casei antibody. The third is the addition of anti-L. casei antibody after the addition of anti-L. casei antibody. The fourth is the addition of anti-L. casei antibody after the addition of anti-L. casei antibody. The third is the addition of anti-L.casei antibody after the addition of anti-L.casei antibody after the addition of anti-L.casei antibody. The results showed that the neutral glycolipid, GA1, CTH(Ceramide trihexoside), Lactosylceramide and Galactosylceramide were the binding factors of this bacterium. The presence of lactic acid in the presence of lipids containing acidic sugars is a barrier to the development of lactic acid bacteria. GM1 is the most important component of the system. Globoside β-N-Acetylhexosaminase acts as a binding agent for L.casei. As a result, the strain was able to bind specifically to neutral glycolipid at the non-reducing end of the carbohydrate chain. This bacteria is the best combination of CTH and GA1. In addition, the acid glycolipid and neutral glycolipid in the small intestine mucosa are extracted and extracted separately, and the sugar lipid and neutral glycolipid in the small intestine are extracted and extracted separately. A side, sugar lock and combination of L.casei membrane receptor, heat very strong, medium quality, medium quality, high temperature, high temperature,