Crystal structure analysis for the pathogenesis of thrombosis

血栓发病机制的晶体结构分析

• 批准号: 23570155
• 负责人: AKIYAMA Masashi
• 金额: $ 3.49万
• 依托单位: National Cardiovascular Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23570155/
• 关键词: ADAMTS13; von Willebrand因子; 結晶構造; 酵素動力学; VWF; ずり応力; プロテインS

A P475S polymorphism in the ADAMTS-13 gene causes an reduction in plasma VWF-cleaving activity. To demonstrate the impact of this mutation, we determined the crystal structure of the P475S mutant of ADAMTS13-DTCS (DTCS-P475S) and the enzymatic parameters of MDTCS-P475S. Structural analysis showed that the conformation of the V-loop was significantly different in DTCS-P475S, where no obvious interactions of Ser475 with other residues were observed. MDTCS-P475S showed a reaction rate similar to that of wild-type MDTCS, but showed two-fold lower affinity for the peptidyl substrate. MDTCS-P475S can moderately cleave shear-treated VWF. We have provided structural evidence that the P475S polymorphism in ADAMTS-13 leads to increased local structural instability, resulting in lowered affinity for the substrate without changing the reaction rate. The moderate activity of ADAMTS-13-P475S for shear-treated VWF is sufficient to prevent thrombotic thrombocytopenic purpura onset.

ADAMTS-13基因的P475S多态性导致血浆vwf切割活性降低。为了证明这种突变的影响，我们测定了ADAMTS13-DTCS P475S突变体（DTCS-P475S）的晶体结构和MDTCS-P475S的酶学参数。结构分析表明，在DTCS-P475S中，V-loop的构象有显著差异，Ser475与其他残基没有明显的相互作用。MDTCS- p475s的反应速率与野生型MDTCS相似，但对肽基底物的亲和力降低了2倍。MDTCS-P475S对剪切处理的VWF具有中等劈裂作用。我们已经提供了结构证据表明，P475S多态性在ADAMTS-13中导致局部结构不稳定性增加，导致对底物的亲和力降低而不改变反应速率。ADAMTS-13-P475S在剪切处理的VWF中具有中等活性，足以预防血栓性血小板减少性紫癜的发作。

项目成果

マウス急性心筋梗塞モデルにおけるADAMTS13の心筋保護作用

ADAMTS13对小鼠急性心肌梗死模型的心脏保护作用

• 发表时间: 2013
• 作者: 土井政明;松井英人;竹田征治;斎藤能彦;武田麻衣子;松成泰典;西尾健治;嶋緑倫;坂野史明;秋山正志;小亀浩市;宮田敏行;杉本充彦
• 通讯作者: 杉本充彦

秋山 正志 ｜分子病態部｜組織・各部の紹介｜国立循環器病研究センター研究所

秋山正史 | 分子病理学系介绍 | 国立脑心血管中心研究所

ADAMTS13 improving the cell engraftment efficacy in mouse model of bone marrow transplantation.

ADAMTS13 提高小鼠骨髓移植模型中的细胞植入效率。

• 发表时间: 2012
• 作者: 白井剛志;藤井博司;中村恭平;渡部龍;田島結実;高澤徳彦;石井智徳;張替秀郎;Hideto Matsui
• 通讯作者: Hideto Matsui

哺乳類細胞を用いたADAMTS13ドメインの一過性大量発現

使用哺乳动物细胞瞬时大规模表达 ADAMTS13 结构域

• 发表时间: 2013
• 作者: 平井秀憲;秋山正志;宮田敏行
• 通讯作者: 宮田敏行

Structural basis for ADAMTS13 function.

ADAMTS13 功能的结构基础。

• 作者: Akiyama M;Nakayama D;Takeda S;Kokame K;Takagi J;Miyata T
• 通讯作者: Miyata T