Basic evaluation of diagnosis of nucleic acid metabolizing enzyme deficiency by flow cytometry

流式细胞术诊断核酸代谢酶缺乏症的基本评价

• 批准号: 23590668
• 负责人: NOBORI Tsutomu
• 金额: $ 3.33万
• 依托单位: Mie University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23590668/
• 关键词: MTAP; 酵素欠損; プリン代謝; フローサイトメトリー; 選択的化学療法; コンパニオン診断薬; プロモーターメチル化; DNAメチル化; 個別化医療; エピトープマッピング; 形質転換細胞

Methylthioadeosine phosphorylase (MTAP) is frequently deficient in a variety of malignancies, although the enzyme is active in normal cells or tissues. This difference in enzyme activities can be exploited to design the tumor-specific chemotherapy.We tried to develop the diagnostic method of MTAP enzyme deficiency which can be easily applied to clinical samples compared to genetic diagnosis. Anti-MTAP monoclonal antibody which we generated worked well with certain cell lines, whereas it did not with other cell lines. This might be caused by the difference in the amount of MTAP protein expressed.Since MTAP deficiency is known to be caused by the gene deletion or promoter hypermethylation, we developed the rapid high-pressure liquid chromatography (HPLC) to detect methylated DNA. PCR products were amplified from the methyl sulfite-modified DNA and PCR products with single nucleotide substituions were separated by HPLC.

甲硫氨酸磷酸化酶(MTAP)在多种恶性肿瘤中经常缺乏，尽管该酶在正常细胞或组织中是活跃的。这种酶活性的差异可以被用来设计肿瘤特异性化疗药物。我们试图建立MTAP酶缺陷的诊断方法，与基因诊断相比，这种方法更容易应用于临床样本。我们制备的抗MTAP单抗对某些细胞株有效，而对其他细胞株无效。这可能是由于MTAP蛋白表达的量不同造成的。鉴于MTAP缺乏症是由基因缺失或启动子超甲基化引起的，我们建立了快速高压液相色谱(HPLC)检测甲基化DNA。从亚甲基亚硫酸盐修饰的DNA中扩增出聚合酶链式反应产物，用高效液相色谱分离出带有单核苷酸取代基的聚合酶链式反应产物。

项目成果

個別化医療におけるバイオマーカーとコンパニオン診断薬

个性化医疗中的生物标志物和伴随诊断

• 发表时间: 2013
• 期刊: レギュラトリーサイエンス学会誌
• 作者: 登勉;望木郁代;中谷中
• 通讯作者: 中谷中

GENECUBEを用いたQプローブ法によるIL28B遺伝子SNP解析法の開発

使用GENECUBE开发使用Q探针法的IL28B基因SNP分析方法

• 发表时间: 2013
• 期刊: 日本臨床検査自動化学会誌
• 作者: 松尾百華;阿部泰典;杉本和史;西岡淳二;川嶋洋介;曽家義博;中谷中;登勉
• 通讯作者: 登勉

個別化医療におけるバイオカーカーとコンパニオン診断薬

个性化医疗中的生物癌症和伴随诊断

• 发表时间: 2013
• 期刊: レギュラトリーサイエンス学会誌
• 作者: 登勉;望木郁代;中谷中
• 通讯作者: 中谷中

Clinical Utility of a panfungal polymerase chain reaction assay for invasive fungal diseases in patients with hematologic disorders

全真菌聚合酶链反应测定在血液系统疾病患者侵袭性真菌病中的临床应用

• 发表时间: 2013
• 期刊: European Journal of Hematology
• 作者: Sugawawa Y;Nakase K;Nakamura A;Ohishi K;Sugimoto Y;Fujieda A;Monma F;Suzuki K;Masuya M;Matsushima Y;Wada H;Nobori T;Katayama N
• 通讯作者: Katayama N

コンパニオン診断ー個別化医療への挑戦

伴随诊断——个性化医疗的挑战

• 发表时间: 2012
• 期刊: SRL宝函
• 作者: Takano;T;伊藤裕美ら;登 勉
• 通讯作者: 登 勉