抗がん剤開発に向けての微小管によるキネトコア捕捉および染色体異数性成立機構の解明

阐明微管捕获着丝粒和染色体非整倍体的机制，用于抗癌药物的开发

基本信息

批准号：
12F02100
负责人：
田中耕三
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012 至 2013
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12F02100/
关键词：
染色体分配異数性キネトコア微小管抗がん剤

项目摘要

がん細胞の大部分では染色体数の異常(異数性)が認められ、その多くでは正常細胞より染色体数が多い。染色体分配は、中心体から伸長する微小管が染色体上のキネトコアと結合して染色体を中心体へと引っ張ることによって起こる。そこで本研究では、新たな抗がん剤のターゲットとして、効率的なキネトコア捕捉の分子機構を明らかにすることを目的とする。平成25年度には、平成24年度に効率的なキネトコア捕捉に重要な分子として同定したCLIP-170の作用機構の解明を目指した。1. CLIP-170によるPlk1のキネトコア局在の制御(J Cell Sci, in press)CLIP-170をノックダウンすると分裂期キナーゼPlk1のキネトコア局在が減少した。解析の結果、Plk1はCdk1によるCLIP-170のリン酸化依存性にCLIP-170と結合することが判明した。CLIP-170をノックダウンした細胞でCdk1によるリン酸化部位に変異をもつCLIP-170を発現させてもPlk1のキネトコア局在は回復せず、CdklによるCLIP-170のリン酸化依存性にPlk1のキネトコア局在が制御されていることが示唆された。2. CLIP-170とダイニンの拮抗作用(投稿準備中)CLIP-170をノックダウンすると高度の染色体整列異常が起こるが、CLIP-170と結合してそのキネトコア局在に関与するダイナクチンのノックダウンでは軽度の染色体整列異常しか見られない。ダイナクチンはモーター分子ダイニンと結合してその制御を行っていることが知られている。解析の結果、CLIP-170がダイニンの過剰なはたらきを抑えることにより染色体整列に寄与していることが示唆された。以上の結果から、CLIP-170が他のキネトコア分子と相互作用しながら効率的なキネトコア捕捉に関与することが明らかになった。

大多数癌细胞的染色体数量（非整倍性）异常，在大多数染色体中，染色体的数量高于正常细胞的染色体。当微管从中心体与染色体上的动力学结合并将染色体拉向中心体时，会发生染色体分布。因此，这项研究旨在阐明有效的运动动物捕获的分子机制，作为新型抗癌药物的靶标。 2013年，我们旨在阐明夹170的作用机理，该机制被确定为2012年有效的动力捕获的重要分子。1。调节clip-170（J细胞SCI，in Press）对PLK1定位的调节PLK1定位，clip-170 clip-170降低了Kinetocore kinetocoration the MiTotic Kinase plkase prok1 prok1的敲低。分析表明，PLK1通过CDK1以磷酸化依赖性方式结合夹170。 Clip-170的表达在撞击夹170的细胞中在磷酸化位点具有突变的表达并未恢复PLK1的动力学定位，这表明调节了CDKL的CLIP-170的磷酸化。 2。夹170和动力蛋白的拮抗作用（准备发布）clip-170的敲低会导致严重的染色体比对异常，但敲低dynactin与clip-170结合并参与其动力学定位，只有轻度的染色体平均异常。众所周知，Dynactin与运动分子动力蛋白结合并控制它。分析表明，CLIP-170通过抑制过度的动力蛋白功能来促进染色体比对。上述结果表明，夹170与其他动力学分子相互作用时参与了有效的动力捕获。