抗がん剤開発に向けての微小管によるキネトコア捕捉および染色体異数性成立機構の解明

阐明微管捕获着丝粒和染色体非整倍体的机制，用于抗癌药物的开发

• 批准号: 12F02100
• 负责人: 田中 耕三
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12F02100/
• 关键词: 染色体分配; 異数性; キネトコア; 微小管; 抗がん剤

がん細胞の大部分では染色体数の異常(異数性)が認められ、その多くでは正常細胞より染色体数が多い。染色体分配は、中心体から伸長する微小管が染色体上のキネトコアと結合して染色体を中心体へと引っ張ることによって起こる。そこで本研究では、新たな抗がん剤のターゲットとして、効率的なキネトコア捕捉の分子機構を明らかにすることを目的とする。平成25年度には、平成24年度に効率的なキネトコア捕捉に重要な分子として同定したCLIP-170の作用機構の解明を目指した。1. CLIP-170によるPlk1のキネトコア局在の制御(J Cell Sci, in press)CLIP-170をノックダウンすると分裂期キナーゼPlk1のキネトコア局在が減少した。解析の結果、Plk1はCdk1によるCLIP-170のリン酸化依存性にCLIP-170と結合することが判明した。CLIP-170をノックダウンした細胞でCdk1によるリン酸化部位に変異をもつCLIP-170を発現させてもPlk1のキネトコア局在は回復せず、CdklによるCLIP-170のリン酸化依存性にPlk1のキネトコア局在が制御されていることが示唆された。2. CLIP-170とダイニンの拮抗作用(投稿準備中)CLIP-170をノックダウンすると高度の染色体整列異常が起こるが、CLIP-170と結合してそのキネトコア局在に関与するダイナクチンのノックダウンでは軽度の染色体整列異常しか見られない。ダイナクチンはモーター分子ダイニンと結合してその制御を行っていることが知られている。解析の結果、CLIP-170がダイニンの過剰なはたらきを抑えることにより染色体整列に寄与していることが示唆された。以上の結果から、CLIP-170が他のキネトコア分子と相互作用しながら効率的なキネトコア捕捉に関与することが明らかになった。

Most of the で <s:1> chromosome number <e:1> in がん cells is abnormal (heterozygous), and が cells recognize that められ and そ cells have more くで くで normal cells よ <s:1> have more が chromosome number が than がん. Chromosome distribution は, centrosome か ら elongation す る tiny tube が chromosome の キ ネ ト コ ア と combining し て chromosome を centrosome へ と lead っ zhang る こ と に よ っ て up こ る. そ こ で this study で は, new た な resistance が ん tonic の タ ー ゲ ッ ト と し て, sharper rate な キ ネ ト コ ア capture の molecular institutions を Ming ら か に す る こ と を purpose と す る. Pp.47-53 25 year に は, pp.47-53 24 year に sharper rate な キ ネ ト コ ア capture important molecular と な に し て with fixed し た CLIP - 170 の role institutions の interpret を refers し た. 1. The CLIP - 170 に よ る Plk1 の キ ネ ト コ ア bureau in の suppression (J Cell Sci, in press) CLIP - 170 を ノ ッ ク ダ ウ ン す る と divide キ ナ ー ゼ Plk1 の キ ネ ト コ ア bureau in が reduce し た. Analytical の results, Plk1 は Cdk1 に よ る CLIP - 170 の リ ン acidification dependency に CLIP - 170 と combining す る こ と が.at し た. CLIP - 170 を ノ ッ ク ダ ウ ン し た cells で Cdk1 に よ る リ ン に acidification parts - different を も つ CLIP - 170 を 発 now さ せ て も Plk1 の キ ネ ト コ ア bureau in reply は せ ず, Cdkl に よ る CLIP - 170 の リ ン acidification dependency に Plk1 の キ ネ ト コ ア bureau in が suppression さ れ て い る こ と が Sot された. 2. CLIP - 170 と ダ イ ニ ン の antagonism effect (contribute to) CLIP - 170 を ノ ッ ク ダ ウ ン す る と highly の chromosomes and abnormal が up こ る が, as well as the combination of CLIP - 170 と し て そ の キ ネ ト コ ア bureau in に masato and す る ダ イ ナ ク チ ン の ノ ッ ク ダ ウ ン で は 軽 degrees の chromosomes and abnormal し see か ら れ な い. ダ イ ナ ク チ ン は モ ー タ ー molecular ダ イ ニ ン と combining し て そ の suppression を line っ て い る こ と が know ら れ て い る. Parsing の results, the CLIP - 170 が ダ イ ニ ン の through turning な は た ら き を え suppression る こ と に よ り chromosome に send whole series and し て い る こ と が in stopping さ れ た. Results above の か ら, CLIP - 170 が he の キ ネ ト コ ア molecular と interaction し な が ら working rate of な キ ネ ト コ ア capture に masato and す る こ と が Ming ら か に な っ た.

项目成果

キネトコアが微小管の側面に結合する分子メカニズムの解明

阐明动粒与微管侧面结合的分子机制

• 发表时间: 2012
• 作者: Iwai R;Haruki R;Nemoto Y;Nakayama Y;中村 秀司;日高 秀徳，安養寺正之，岡本 正人;伊藤 剛
• 通讯作者: 伊藤 剛

分裂期初期におけるキネトコア―微小管結合の解析

有丝分裂早期着丝粒-微管结合的分析

• 发表时间: 2013
• 作者: 池田真教;伊藤剛;家村顕自;M. A. Amin;田中耕三
• 通讯作者: 田中耕三

キネトコアと微小管の双方向性結合の成立過程の解析

动粒与微管双向耦合形成过程分析

• 发表时间: 2012
• 作者: 伊藤 剛

CLIP-170 is required to recruit PLK1 to kinetochores during early mitosis for chromosome alignment

在早期有丝分裂期间需要 CLIP-170 将 PLK1 募集到着丝粒以进行染色体排列

• 发表时间: 2014
• 期刊: J Cell Sci
• 影响因子: 4
• 作者: M. A. Amin;伊藤剛;家村顕自;池田真教;田中耕三
• 通讯作者: 田中耕三

Chromokinesin Kid and kinetochore kinesin CENP-E differentially support chromosome congression during prometaphase

染色驱动蛋白 Kid 和着丝粒驱动蛋白 CENP-E 在前期中期对染色体国会有不同的支持

• 作者: 家村顕自;伊藤剛;池田真教;M.A.Amin;田中耕三
• 通讯作者: 田中耕三