紡錘体チェックポイントによる染色体分配制御ネットワークの解明

点击翻译按钮获取中文摘要

細胞分裂期における染色体の均等な分配を制御する代表的な機構として、紡錘体チェックポイントが存在する。本研究では、ヒト細胞において紡錘体チェックポイントに関連する新規分子を同定し、それらの分子のネットワークによる染色体分配制御機構を解明することを目的とする。平成20年度には、紡錘体チェックポイントに関連する分子と結合する分子の同定を行った。まずFLAGタグのついた紡錘体チェックポイント関連分子を発現するヒト293細胞を樹立した。次にこれらの細胞の抽出液について、FLAGに対する抗体による免疫沈降を行い、紡錘体チェックポイント関連分子と結合している分子をマススペクトロメトリーにて同定した。このうち酵母の紡錘体チェックポイント分子であるMad2のヒトホモローグの1つであるMAD2L2と結合する新規分子として、C13orf8を同定した。解析の結果C13orf8は染色体および紡錘体に局在し、染色体分配に関与していることが示唆された。平成21年度には、平成20年度の成果をふまえ、C13orf8による染色体分配制御機構について詳細な解析を行った。その結果C13orf8をノックダウンした細胞では、細胞分裂期における染色体の赤道面への整列に異常が生じており、C13orf8がキネトコア-微小管結合に関与していることが示唆された。このような分子は、動物細胞でのより繊細な染色体分配制御機構に関連していることが予想され、その異常は染色体不安定性を引きおこし、がん化と関連している可能性がある。現在さらにC13orf8の機能解析を進めている。