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in vitroで選択・誘導した抗原特異的抗体産生細胞による癌治療モデルの構築

使用体外筛选和诱导的抗原特异性抗体产生细胞构建癌症治疗模型

基本信息

批准号：
12J08179
负责人：
馬渡達也
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Tokyo University of Science
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012 至 2013
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12J08179/
关键词：
細胞療法抗腫瘍療法 B細胞培養抗原特異性抗体産生細胞

项目摘要

本研究課題では、当研究室で新たに確立したiGB細胞培養系を応用することで、現在の癌ワクチン療法では行われていない、液性免疫を効果的に誘導する新たな治療型ワクチンの構築を目的としている。前年度までに行った、(1)抗原特異的iGB細胞を用いたプラズマ細胞療法によるメラノーマ転移抑制のマウスモデル実験、(2)抗原特異的B細胞選択系の構築、(3)(1)及び(2)を組み合わせたin vitroで選択した抗原特異的B細胞を用いた腫瘍転移抑制のマウスモデル実験、以上3点について論文にまとめ、国際学術誌に発表した。また上記のマウスモデルでの研究をさらに発展すべく、本年度は特にヒト末梢血B細胞の中から抗原特異的な細胞を選択濃縮する系を確立することを目標として研究に取り組んだ。まずはマウスモデルでの条件を基に、ヒト末梢血B細胞を濃縮できるかを試みた。しかしながら抗原特異的なB細胞は濃縮できなかった。その原因としてFasL細胞死刺激耐性の細胞の出現、及び適切な刺激時間がマウスとヒトのB細胞で異なるということが考えられた。そこでこの問題を解決すべく、様々な培養条件の検討を行った。その結果IL-21に代わりIL-24で培養することにより、ヒトiGB細胞のFasL耐性細胞への分化を抑制できることを見出した。これは選択濃縮の効率を上昇させるために重要である。また代替抗原として抗ヒトκ鎖抗体をCD16陽性フィーダー細胞上に固定し、κ鎖陽性ヒトiGB細胞を選択濃縮できることを示した。この結果は、ヒトiGB細胞を用いた抗原特異的な細胞を選択濃縮するモデル系ができたことを意味し、ヒトB細胞における最適刺激時間を検討することができることを意味する。以上の結果は、ヒト末梢血B細胞から抗原特異的B細胞を選択的に濃縮するために前進したことを示唆する。

This research project aims to establish a new type of cell culture system for cancer therapy, and to induce a new type of cell culture. In the past year, the following three points have been discussed: (1) the development of antigen-specific iGB cells for cell therapy,(2) the construction of antigen-specific B cell selection lines,(3) the combination of (1) and (2) the selection of antigen-specific B cells for cell therapy, and (3) the development of antigen-specific B cell selection for cell therapy. This year's study was conducted to establish an antigen-specific cell selection system for peripheral blood B cells. The conditions for the development of peripheral blood B cells are: Antigen-specific B cells are concentrated. The reason for this is that FasL cells are resistant to stimulation, and the stimulation time is different from B cells. To solve this problem, we will discuss the cultivation conditions. The results showed that IL-21 and IL-24 inhibited the differentiation of FasL-resistant iGB cells in culture. This is the first time I've seen this. Antigen substitution and anti-kappa-lock antibodies were immobilized on CD16 positive cells, and kappa-lock positive cells were selected and concentrated. These results suggest that the optimal stimulation time for iGB cells and antigen-specific cell selection and concentration may be used to determine the optimal stimulation time for iGB cells. These results indicate that the concentration of B cells from peripheral blood and antigen-specific B cells is increasing.