Analyse der Ca2+-abhängigen Regulation von Membran/Zytoskelett-Interaktionen

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ERM (Ezrin/Radixin/Moesin) Proteine vermitteln eine regulierte Verknüpfung von Membranproteinen mit dem Aktin-Zytoskelett. Sie sind hierdurch an Prozessen beteiligt, die von der Organisation der Zelloberfläche bis zur Steuerung von Zell-Zell-Kontakten reichen. Kürzlich konnten wir eine neuartige, Ca2+-abhängige Regulation des Ezrins identifizieren, die auf einer direkten Wechselwirkung mit dem Ca2+-bindenden Protein S1O0P und einer resultierenden Demaskierung der F-Aktin Bindungsstelle im Ezrin beruht. Wir wollen nun verstehen, wie diese Ca2+/S100P-abhängige Aktivierung in Ezrin-vermittelte Prozesse eingreift. Durch spezifische Störung der Ezrin-S 100P Wechselwirkung soll die Bedeutung der Ca2+/S1OOP-abhängigen Aktivierung des Ezrins für die Ausbildung von Mikrovilli und die Regulation von Zell-Zell-Kontakten ermittelt werden. Daneben sollen strukturelle und biochemische Analysen klären, wie die EzrinS1OOP Interaktion zur konformativen Aktivierung von Aktin- und Membranprotein-bindenden Eigenschaften im Ezrin führt. Schließlich wollen wir die Interaktion des S1OOP mit einem anderen Regulator des kortikalen Zytoskeletts, IQGAP1, charakterisieren sowie Bindungspartner weiterer im Zellkortex lokalisierter S1OO Proteine durch einen neuartigen biochemischen Ansatz bestimmen.