ナスの細胞質雄性不稔の遺伝学的および分子遺伝学的研究

茄子细胞质雄性不育的遗传与分子遗传学研究

• 批准号: 15F14389
• 负责人: 一色 司郎
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Saga University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015-04-24 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15F14389/
• 关键词: ナス属野生種; PCR-RFLP; 細胞質同定; 葉緑体DNA

本研究室では、ナス属野生種の細胞質を利用したナスSolanum melongenaの雄性不稔系統の開発、育成に関する研究を行っている。本研究では、この細胞質雄性不稔の研究において必要となる栽培ナスおよび野生種の細胞質を同定できる識別法の開発ために、葉緑体DNAのPCR-RFLP分析を行った。供試材料として、4種類の栽培ナス‘長崎長’, ‘千両二号’, ‘Mireda’および‘Uttara’と11種類のナス属野生種S. incanum (LS4016, LS4018), S. macrocarpon, S. virginianum, S. torvum, S. aethiopicum, S. gilo, S. anguivi, S. grandifolium, S. violaceumおよびS. kurziiを用いた。これらの若葉からキアゲンDNeasy Plant Mini Kitを使用してDNAを抽出し、これを20ng/μlに調整してPCRを行う際の鋳型とした。その後、葉緑体DNAのtrnS-trnG, psbC-trnS, trnC-trnD, trnH-trnK, trnk1-trnk2およびtrnLの6領域において7種類の制限酵素 Alu Ⅰ、Hae Ⅲ、HinfⅠ、Mbo Ⅱ、Msp Ⅰ、Rsa ⅠおよびTaq Ⅰを用いてPCR-RFLP分析を行った。葉緑体DNAのtrnS-trnG, psbC-trnSおよびtrnk1-trnk2領域では、供試した材料において増幅産物のバンドが複数みられたものがあった。このことから、目的の領域が特異的に増幅されなかったと考えられる。葉緑体DNAのtrnC-trnD, trnH-trnKおよびtrnL領域では、供試した材料すべてにおいて増幅産物のバンドが1本明瞭にみられ、そのサイズはすべて同一であった。本実験で用いたすべての領域および制限酵素による消化において‘長崎長’, ‘千両二号’, ‘Mireda’および‘Uttara’とS. aethiopicum, S. gilo, S. anguiviおよびS. grandifoliumとS. violaceumおよびS. kurziiではそれぞれ同一のバンドパターンを示したため、これらはそれぞれ近縁であると考えられる。本実験において栽培ナスおよび野生種の細胞質の同定にtrnH-trnK領域のHinfⅠによるPCR-RFLP分析が有効であると考えられる。

该实验室正在研究使用野生茄子物种的细胞质进行茄子茄属茄剂的雄性无菌菌株的发展和繁殖。在这项研究中，对叶绿体DNA进行了PCR-RFLP分析，以开发一种鉴定细胞质雄性不育所需的培养茄子和野生物种的胞质的方法。 Four types of cultivated eggplants, Nagasaki Naga, Senryo No. 2, Mireda and Uttara, and 11 types of wild eggplant species, S. incanum (LS4016, LS4018), S. macrocarpon, S. virginianum, S. torvum, S. aethiopicum, S. gilo, S. anguivi, S. grandifolium, S. violaceum, and S. kurzii were用作测试材料。使用Qiagen Dneasy Plant Mini套件从这些幼叶中提取DNA，并将其调整为20 ng/μl以形成PCR模板。随后，在六个区域的叶绿体DNA：TRNS-TRNG，PSBC-TRNS，TRNC-TRND，TRNH-TRNK，TRNK1-TRNK2和TRNL进行了PCR-RFLP分析，使用七种类型在测试材料中观察到了叶绿体DNA的TRNS-TRNG，PSBC-TRN和TRNK1-TRNK2区域，分化产物的多个带。这表明感兴趣的区域没有得到特别扩增。在叶绿体DNA的TRNC-TRND，TRNH-TRNK和TRNL区域中，在所有测试的材料中都可以清楚地看到一个放大产物的谱带，并且它们的所有尺寸都是相同的。在该实验中使用的所有区域和限制酶的消化中，长崎naga，Senryo 2号，Mireda和Uttara，S。Aethiopicum，S。Gilo，S。Gilo，S。Anguivi和S. Grandifium，S。viveraceum和S. viveraceum和S. kurzii各自表现出相同的频段模式，并且与这些相同的频段相关。在此实验中，使用TRNH-TRNK区域的HINF I进行PCR-RFLP分析被认为有效鉴定培养的茄子和野生物种的胞质。

项目成果

Anther culture of the male fertile lines in three CMS systems of eggplant with the cytoplasms of Solanum aethiopicum, S. anguivi and S. grandifolium

茄子雄性可育系在茄子三个CMS系统中以茄子、安吉维和大叶茄细胞质进行花药培养

• 发表时间: 2016
• 作者: Khan;M. M. R.;M. Hasnunnahar;M. Iwayoshi;Yuki Ogura-Tsujita and S. Isshiki
• 通讯作者: Yuki Ogura-Tsujita and S. Isshiki

Anther culture of a male sterile line of eggplant with the cytoplasm of Solanum violaceum

紫茄细胞质茄子雄性不育系的花药培养

• 发表时间: 2015
• 作者: Khan;M. M. R.;M. Hasnunnahar;M. Iwayoshi;H. Watanabe;Yuki Ogura-Tsujita and S. Isshiki
• 通讯作者: Yuki Ogura-Tsujita and S. Isshiki