ナスの細胞質雄性不稔の遺伝学的および分子遺伝学的研究

茄子细胞质雄性不育的遗传与分子遗传学研究

• 批准号: 15F14389
• 负责人: 一色 司郎
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Saga University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015-04-24 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15F14389/
• 关键词: ナス属野生種; PCR-RFLP; 細胞質同定; 葉緑体DNA

本研究室では、ナス属野生種の細胞質を利用したナスSolanum melongenaの雄性不稔系統の開発、育成に関する研究を行っている。本研究では、この細胞質雄性不稔の研究において必要となる栽培ナスおよび野生種の細胞質を同定できる識別法の開発ために、葉緑体DNAのPCR-RFLP分析を行った。供試材料として、4種類の栽培ナス‘長崎長’, ‘千両二号’, ‘Mireda’および‘Uttara’と11種類のナス属野生種S. incanum (LS4016, LS4018), S. macrocarpon, S. virginianum, S. torvum, S. aethiopicum, S. gilo, S. anguivi, S. grandifolium, S. violaceumおよびS. kurziiを用いた。これらの若葉からキアゲンDNeasy Plant Mini Kitを使用してDNAを抽出し、これを20ng/μlに調整してPCRを行う際の鋳型とした。その後、葉緑体DNAのtrnS-trnG, psbC-trnS, trnC-trnD, trnH-trnK, trnk1-trnk2およびtrnLの6領域において7種類の制限酵素 Alu Ⅰ、Hae Ⅲ、HinfⅠ、Mbo Ⅱ、Msp Ⅰ、Rsa ⅠおよびTaq Ⅰを用いてPCR-RFLP分析を行った。葉緑体DNAのtrnS-trnG, psbC-trnSおよびtrnk1-trnk2領域では、供試した材料において増幅産物のバンドが複数みられたものがあった。このことから、目的の領域が特異的に増幅されなかったと考えられる。葉緑体DNAのtrnC-trnD, trnH-trnKおよびtrnL領域では、供試した材料すべてにおいて増幅産物のバンドが1本明瞭にみられ、そのサイズはすべて同一であった。本実験で用いたすべての領域および制限酵素による消化において‘長崎長’, ‘千両二号’, ‘Mireda’および‘Uttara’とS. aethiopicum, S. gilo, S. anguiviおよびS. grandifoliumとS. violaceumおよびS. kurziiではそれぞれ同一のバンドパターンを示したため、これらはそれぞれ近縁であると考えられる。本実験において栽培ナスおよび野生種の細胞質の同定にtrnH-trnK領域のHinfⅠによるPCR-RFLP分析が有効であると考えられる。

Our laboratory conducts research on the utilization of cytoplasm of wild species of Solanum melongena and the development and breeding of male-infertile systems of Solanum melongena. This study is based on the research on cytoplasmic male incompatibility and the necessity of cultivating and cultivating wild species. The identification method of cytoplasm is the same as the identification method, and the PCR-RFLP analysis of chloroplast DNA is the same. The test materials include 4 species of cultivated として, 'Nagasaki Naga', 'Senbu No. 2', 'Mireda' および'Uttara' and 11 species of のナス, which belong to the wild species S. incanum (LS4016, LS4018), S. macrocarpon, S. virginianum, S. torvum, S. aethiopicum, S. gilo, S. anguivi, S. grandifolium, S. violaceumおよびS. kurziiを用いた. The DNeasy Plant Mini Kit uses してDNA extracted and 20ng/μl adjusted PCR.その后, chloroplast DNA のtrnS-trnG, psbC-trnS, trnC-trnD, trnH-trnK, trnk1-trnk2 およびtrnLの6 domain において 7 types of restriction enzymes Alu Ⅰ, Hae Ⅲ, HinfⅠ, Mbo Ⅱ, Msp Ⅰ, Rsa ⅠおよびTaq ⅠをUse いてPCR-RFLP to analyze を行った. Chloroplast DNAのtrnS-trnG, psbC-trnS およびtrnk1-trnk2 field では, test した material において amp product のバンドがplural みられたものがあった.このことから、The purpose of the field is specific に Increase the width of the されなかったと卡えられる. Chloroplast DNAのtrnC-trnD, trnH-trnKおよびtrnL fieldでは、test materialすべてにおいてThe enlarged product, のバンドが1, is the same as the original にみられ and そのサイズはすべて. aethiopicum, S. gillo, S. anguiviおよびS. grandifoliumとS. violaceumおよびS. kurzii ではそれぞれ Same as のバンドパターンをshows したため, これらはそれぞれ near縁であると考えられる. This の験において cultivated ナスおよびwild species のcytoplasmic のtrnH-trnK field のHinfⅠによるPCR-RFLP analysis であるとtest えられる.

项目成果

Pollen degeneration in three functional male-sterile lines of eggplant with the wild Solanum cytoplasms

• DOI: 10.1007/s13580-015-0015-3
• 发表时间: 2015-07
• 期刊: Horticulture, Environment, and Biotechnology
• 作者: Md. Mizanur Rahim Khan;Mst. Hasnunnahar;Masaki Iwayoshi;Y. Ogura‐Tsujita;S. Isshiki

Anther culture of the male fertile lines in three CMS systems of eggplant with the cytoplasms of Solanum aethiopicum, S. anguivi and S. grandifolium

茄子雄性可育系在茄子三个CMS系统中以茄子、安吉维和大叶茄细胞质进行花药培养

• 发表时间: 2016
• 作者: Khan;M. M. R.;M. Hasnunnahar;M. Iwayoshi;Yuki Ogura-Tsujita and S. Isshiki
• 通讯作者: Yuki Ogura-Tsujita and S. Isshiki

Anther culture of a male sterile line of eggplant with the cytoplasm of Solanum violaceum

紫茄细胞质茄子雄性不育系的花药培养

• 发表时间: 2015
• 作者: Khan;M. M. R.;M. Hasnunnahar;M. Iwayoshi;H. Watanabe;Yuki Ogura-Tsujita and S. Isshiki
• 通讯作者: Yuki Ogura-Tsujita and S. Isshiki