权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）感染に必要な宿主因子の同定とその制御機構の解析

乙型肝炎病毒（HBV）感染所需宿主因素的鉴定及其控制机制分析

基本信息

批准号：
15J03185
负责人：
岩本将士
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Tokyo University of Science
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2015
资助国家：
日本
起止时间：
2015-04-24 至 2018-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15J03185/
关键词：
HBV NTCP HDV

项目摘要

B型肝炎ウイルス (HBV) 感染分子機構のうち、特にウイルス感染に必須な宿主との相互作用の理解は充分ではない。申請者はこれまでに簡便にHBV感染を評価出来る新規細胞培養系としてHepG2-hNTCP-C4細胞を樹立した。本研究ではこの細胞培養系を用いて、HBV感染に関わる宿主因子を同定するために、膜タンパク質であるG-Protein Coupled Receptor (GPCR) を標的としたsiRNAスクリーニングを実施した。標的遺伝子の発現抑制に伴いHBV感染が減少したヒット遺伝子のうち、最も再現性良くHBV感染を減少させたものとしてG Protein-Coupled Receptor 160 (GPR160) を得た。GPR160ノックダウン細胞では、HBVと同じく胆汁酸トランスポーターであるsodium taurocholate cotransporting polypeptide (NTCP) 依存的に細胞内へ侵入するD型肝炎ウイルスの感染も低下していた。この細胞ではNTCP依存的なHBV エンベロープの細胞表面への吸着も低下していた。また、GPR160ノックダウンによりNTCPのmRNA量を減少させる事無く、細胞膜上のNTCPタンパク質量が減少してした。加えてNTCP本来の機能である細胞への胆汁酸の取り込み量も低下した。これらの結果は、GPR160がNTCP の細胞膜上発現を制御する事でHBV感染に寄与する宿主因子であることを示唆する。上記研究により、感染に必要なウイルス-宿主間相互作用の理解のみならず、NTCPおよびこれが関わる胆汁酸取り込みの制御機構の一端が明らかになると期待される。

Hepatitis B ウイルス (HBV) infection molecular institutions のうち, にウイルス infection に must な host との interaction の understand は fully ではない. Applicants はこれまでにを review 価 out simple に HBV infection る new rules on cell culture system として HepG2 cells - hNTCP - C4 を set した. This study ではこの cell culture system を with いて, HBV infection に masato わるを host factors with fixed するために, membrane タンパク qualitative である the G Protein Coupled Receptor (GPCR) を mark とした siRNA スクリーニングを be applied した. Son mark heritage 伝の発 inhibit に now with いが reduce HBV infection したヒット posthumous son 伝のうち, most も reproducibility good くを reduce HBV infection させたものとして G Protein - Coupled Receptor (GPR160) 160 をた. GPR160 ノックダウン cells では, HBV とじく bile acid トランスポーターである sodium taurocholate cotransporting polypeptide (NTCP) Dependent に cells へ invade する hepatitis D ウ <s:1> ススス <s:1> infect <s:1> lower <s:1> てたたた. The <s:1> <s:1> <s:1> cells でへ NTCP dependent なHBV エ <s:1> ベロ <s:1> プププ <s:1> the surface of the <s:1> cells へ are attached to the <s:1> underside ててたたた. また, GPR160 ノックダウンにより NTCP の mRNA decrease をさせる things without く, membrane の NTCP タンパク quality が reduce してした. Add えてNTCP to the へ <s:1> bile acid <e:1> of the <s:1> functional である cells, and take the <s:1> 込み amount <s:1> lower than the <s:1> たた. これらの results は, GPR160 が NTCP の membrane 発 now を suppression するに send で HBV infection and する host factors であることを in stopping する. Written research により, infection に necessary なウイルス - the interaction between the host の understand のみならず, NTCP およびこれが masato わる bile acid take り込みの system が Ming imperial institutions の end らかになると expect される.