Charakterisierung der Genexpression und physiologischen Funktionen des mRNA- Bindeproteins IMP2 im murinen Zentralnervensystem
Charakterisierung der Genexpression und physiologischen Funktionen des mRNA- Bindeproteins IMP2 im murinen Zentralnervensystem
批准号:
5443506
负责人:
Dr. Dana Krämer
金额:
$0.0万
依托单位国家:
德国
项目类别:
Research Fellowships
财政年份:
2004
资助国家:
德国
项目状态:
已结题
起止时间:
2003-12-31 至 2006-12-31
中文摘要
信使核糖核酸结合蛋白的调节作用。蛋白质生物合成的信使核糖核酸的运输。他妈的在生物过程中有一种结合蛋白的基因,这在调控的基本原理中起着重要作用。Das mRNA-BindeProtein IMP2和IGF-II Leader3mRNA是ALS的调节因子,在胚胎发育过程中表达。他是一位伟大的组织者,也是一位杰出的组织者。在体内表达von IMP2基因的MIT Hilfe verschiedener基因敲除MuasModel。Ein IMP2基因敲除/LacZ基因敲入模型在体内的IMP2表达和DEN IMP2基因敲除表型。在有条件的IMP2淘汰赛中,IMP2将在MIT的中场发挥作用。这是一种错误的方法,它是一种新的技术规范,也是一种新的技术和方法。Ein zusätzlices IMP2打入Mausmodell wird eine Neue Methode der Proteinreigung nutzen,um InteraktionsPartner von IMP2 zu Ignieren.Ein‘串联亲和纯化(TAP)-Tag’w an das CarBosylende vonIMP2 Angehängt,MIT Welchem IMP2-Interaktionskomplex(MRNAs Or Der Proteine)gereinigt en könnnen.因此,在MIT Hilfe von Proteine、Well he MIT IMP2 Interagieren、MIT Hilfe von Massenspecktrometrie Idfiziert等微阵列中,我们发现了两种不同的mRNAs。
英文摘要
mRNA-Bindeprotein regulieren Prozesse wie z.B. mRNA Transport, Lokalisierung und Regulierung der Proteinbiosynthese. Damit sind mRNA-Bindeproteine nicht nur wichtige Faktoren in entwicklungsbiologischen Prozessen, sondern auch in der Regulation fundamentaler zellulärer Funktion. Das mRNA-Bindeprotein IMP2 wurde ursprünglich als Regulator der IGF-II leader 3 mRNA während der embryonalen Wachstumsphase entdeckt. Neuere Erkenntnisse zeigen jedoch, dass IMP2 auch in erwachsenen Organismen vorhanden ist, was darauf hinweist, dass die Rolle von IMP2 nicht nur auf entwicklungsbiologische Funktionen beschränkt ist. Das Ziel dieser Arbeit ist deshalb die detaillierte Untersuchung der biologischen Funktionen und Expression von IMP2 in vivo mit Hilfe verschiedener knock-out Muasmodelle. Ein IMP2 knock-out/LacZ knock-in Modell soll Aufschluss über in vivo IMP2 Expressionsmuster und den IMP2 Knock-out Phenotype geben. Die Rolle von IMP2 im murinen Zentralnervensystem wird mit Hilfe ein 'conditional IMP2 knock-out' untersucht werden. Diese Methode erlaubt die spezifische Ausschaltung von IMP2 in Neuronen während späterer Zeitpunkte und hilft so, mögliche Probleme während der Embryonalentwicklung zu vermeiden. Ein zusätzliches IMP2 knock-in Mausmodell wird eine neue Methode der Proteinreinigung nutzen, um Interaktionspartner von IMP2 zu identifizieren. Ein 'tandem affinity purification (TAP)-tag' wird an das Carbosylende vonIMP2 angehängt, mit welchem IMP2-Interaktionskomplexe (mRNAs oder Proteine) gereinigt werden können. Die so erhaltenen mRNAs werden entweder geklont und sequenziert oder mit Hilfe von microarrays identifiziert während Proteine, welche mit IMP2 interagieren, mit Hilfe von Massenspektrometrie identifiziert werden.
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