癌抑制タンパク質ｐ５３誘導性ＰＰＭ１Ｄホスファターゼによる精子形成機構の解明

肿瘤抑制蛋白p53诱导的PPM1D磷酸酶阐明精子发生机制

• 批准号: 16J01123
• 负责人: 小笠原 紗里
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2016
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2016-04-22 至 2019-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16J01123/
• 关键词: ホスファターゼ; 脱リン酸化酵素; スプライスバリアント; 精子形成; 細胞分化

PPM1Dホスファターゼは精子形成への関与が示唆されている。また、スプライスバリアントの精巣および白血球系において組織特異的な発現を見出している。本研究の目的は、精子形成過程におけるPPM1Dスプライスバリアントの機能を解明することである。ヒト精巣由来胚性癌細胞NT2細胞の分化過程におけるPPM1Dの機能を解析した。NT2細胞においてPPM1Dは未分化状態維持に必須であることを明らかにした。また、分化誘導試薬レチノイン酸投与により、短時間で一過的なERKリン酸化レベルの上昇を確認した。さらに、PPM1D阻害剤SL-176投与により、レチノイン酸誘導性ERK活性化が亢進したことから、PPM1DがERKリン酸化レベルの調節を介してレチノイン酸分化誘導経路に関与していることを明らかにした。また、PPM1D阻害剤を用いた生化学的手法によるアプローチは非常に簡便であり、阻害剤研究は抗癌剤のリード化合物としても期待できる。そこで、PPM1D阻害剤SL-176の改良とその阻害機構の詳細な解析を実施した。SL-176の親水性部位および疎水性部位に対する構造活性相関解析により、立体的に嵩高く脂溶性の高い分子がよりPPM1D阻害に適していることが明らかとなった。また、SL-176のアルキルエステル化により細胞内取り込みが上昇し、PPM1D特異性を維持したまま細胞生存率に対する効果を増強できることを示した。

PPM1D is the first time that sperm formation has occurred. Tissue-specific changes in the leukocyte lineage have been observed. The aim of this study was to elucidate the function of PPM1D in spermatogenesis. Analysis of the function of PPM1D in the differentiation process of embryonic carcinoma NT2 cells NT2 cells are required to maintain their undifferentiated state. The increase of ERK activity in a short period of time was confirmed by differentiation test. In addition, PPM1D inhibitor SL-176 is involved in the regulation of ERK activation induced by acid differentiation pathway. The use of PPM1D inhibitors in biochemical methods is very simple, and the study of PPM 1D inhibitors in anticancer compounds is expected. The detailed analysis of the improvement of PPM1D resistance SL-176 and its resistance mechanism is carried out. SL-176 hydrophilic sites and aqueous sites related to structural activity analysis, three-dimensional high fat soluble molecules related to PPM1D resistance The cell viability of SL-176 was increased, and the PPM-1D specificity was maintained.

项目成果

脂肪滴形成抑制効果を有するSer/ThrホスファターゼPPM1D阻害剤

Ser/Thr 磷酸酶 PPM1D 抑制剂可抑制脂滴形成

• 发表时间: 2016
• 作者: 木村望;鎌田瑠泉;工藤風樹;小笠原紗里;吉村文彦;谷野圭持;坂口和靖
• 通讯作者: 坂口和靖

Inhibition of PPM1D phosphatase promotes human NT2/D1 cells differentiation via activation of retinoic acid signaling

抑制 PPM1D 磷酸酶通过激活视黄酸信号促进人 NT2/D1 细胞分化

• 发表时间: 2017
• 作者: Sari Ogasawara;Yoshiro Chuman;Rui Kamada;Toshiaki Imagawa and Kazuyasu Sakaguchi
• 通讯作者: Toshiaki Imagawa and Kazuyasu Sakaguchi

Inhibition of protein phosphatase PPM1D enhances retinoic acid-induced differentiation in human embryonic carcinoma cell line

抑制蛋白磷酸酶 PPM1D 增强视黄酸诱导的人胚胎癌细胞系分化

• DOI: 10.1093/jb/mvy119
• 发表时间: 2018
• 期刊: The Journal of Biochemistry
• 作者: Ogasawara Sari;Chuman Yoshiro;Michiba Takahiro;Kamada Rui;Imagawa Toshiaki;Sakaguchi Kazuyasu
• 通讯作者: Sakaguchi Kazuyasu

脂肪細胞におけるSer/ThrホスファターゼPPM1D阻害の脂肪滴形成に対する効果

Ser/Thr 磷酸酶 PPM1D 抑制对脂肪细胞脂滴形成的影响

• 发表时间: 2016
• 作者: 木村望;鎌田瑠泉;工藤風樹;小笠原紗里;吉村文彦;谷野圭持;坂口和靖
• 通讯作者: 坂口和靖

癌原遺伝子産物プロテインホスファターゼによる細胞癌化機構と阻害剤開発

原癌基因产物蛋白磷酸酶的细胞癌变机制及抑制剂开发

• 发表时间: 2016
• 期刊: 化学工業
• 作者: 小笠原紗里;鎌田瑠泉;坂口和靖
• 通讯作者: 坂口和靖