Aufklärung der Funktionen des Proteasekomplexes TPPII anhand konditionaler Knockout-Mäuse

使用条件敲除小鼠阐明蛋白酶复合物 TPPII 的功能

• 批准号: 5453904
• 负责人: Professorin Dr. Gabriele Niedermann
• 金额: --
• 依托单位: Klinik für Strahlenheilkunde
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2004-12-31 至 2013-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5453904?language=en
• 关键词: Aufkl; rung; der; Funktionen; des

Tripeptidylpeptidase II (TPPII) bildet die größten Proteasekomplexe eukaryotischer Zellen. Wir haben mittels Cre/loxP-System konditionale TPPII-Knockout-Mäuse hergestellt und mit diesen Mäusen bereits die Rolle von TPPII bei der Antigenprozessierung untersucht. Darüber hinaus fanden wir verstärkte prämature Seneszenz bei TPPII-defizienten Fibroblasten und verstärkte Apoptose T-lymphoider Zellen, was sich in vivo in einem Phänotyp äußert, der akzelerierter Immunseneszenz ähnelt. Vor kurzem wurden Hinweise für eine Rolle von TPPII bei DNA-Schadensantworten veröffentlicht. Dies zeigte sich in erhöhter Sensitivität von Tumoren gegenüber γ- Bestrahlung, γ-Strahlen-induzierter Kerntranslokation von TPPII und defekter p53- Aktivierung. Prinzipiell mit einer Rolle bei DNA-Schadensantworten übereinstimmend weisen unsere publizierten und präliminären, nicht publizierten Daten darauf hin, dass der durch TPPII-Defizienz hervorgerufene pleiotrope Phänotyp genomischen Instabilitätssyndromen ähnelt. Genomische Instabilität kann zelluläres und systemisches Altern, Krebs, Immundefizienz, Infertilität als auch erhöhte Radio- und Chemosensitivität verursachen. Wir möchten in der kommenden Antragsperiode diese Symptomatik weiter untersuchen und herausfinden, in wieweit TPPII tatsächlich eine Rolle bei DNA-Schadensantworten und der Aufrechterhaltung der genomischen Stabilität spielt bzw. in wiefern die beobachtete Symptomatik andere Ursachen hat. Im einzelnen untersucht werden sollen: die Ursachen der verstärkten prämaturen zellulären Seneszenz, Onkogen-induzierte Seneszenz, die Rolle von TPPII bei der malignen Transformation und in Tumorzellen und Tumoren mit hoher Expression von c-Myc, welches TPPII induziert, die Strahlen- und Chemosensitivität von primären und transformierten TPPII-defizienten Zellen und von Tumoren in vivo als auch die Ursachen der Infertilität der männlichen TPPII-Knockout-Mäuse. Darüber hinaus sollen vergleichende Proteomics-Analysen von TPPII-Knockout- und Wildtyp-Zellen und die Identifizierung von TPPII-Interaktionspartnern zur Charakterisierung der zellulären Funktionen und der Rolle in der zellulären Proteolyse beitragen.

三肽基肽酶II（TPPII）产生真核生物的蛋白复合物。我们使用了Cre/loxP-系统进行TPPII-敲除-Mäuse检测，并使用该Mäusen检测TPPII在抗原处理中的作用。我们用TPPII-defizienten Fibroblasten和verstärkte Apoptose T-lymphidder Zellen进行了体内试验，结果表明，TPPII-defizienten Fibroblasten和Apoptose T-lymphidder Zellen在体内均表现出免疫敏感性。Vor kurzem wurden Hinweise für eine Rolle von TPPII bei DNA-Schadensantworten veröffentlicht. Dies zeigte sich in erhöhter Sensitivität von TPPII gegenüber γ- Bestrahlung，γ-Strahlen-inducierter Kerntranslocation und defekter p53- Aktivierung. Prinzipiell mit einer Rolle bei DNA-Schadensantworten übereinsimmend weisen unsere schizierten and präliminären，nichten Daten darauf hin，dass der durch TPPII-Defizienz hervorgerufene pleiotrope Phänotype genomischen Instabilitätssyndromen ähnelt. Genomische Instabilität kann zelluläres und systemisches Altern，Krebs，Immundefizienz，Infertilität als auch erhöhte Radio- und Chemosensitivität verursachen.我们在诊断期发现了这些症状，并在TPPII中发现了一个基因组稳定性的DNA-Schadensantworten和Aufrechterhaltung。在我们观察症状和Ursachen帽子时。研究韦尔登的另一个问题是：早期诱导衰老的Ursachen，Onkogen诱导衰老，TPPII在肿瘤转化和肿瘤中的作用，以及c-Myc表达，TPPII诱导，体内诱导和转化TPPII的Strahlen-和Chemosensitivität，以及TPPII-敲除-Mäuse的Infertilität的Ursachen。通过对TPPII敲除和野生型Zellen的蛋白质组学分析，以及TPPII-相互作用伙伴的鉴定，确定了Zellulären功能的特征和Zellulären蛋白水解的作用。