Differentielle Proteom-Analyse Mastitis-infizierter Zellen und Gewebe

Die Infektion von Gewebe mit Mastitis-Erregern führt zu schwerwiegenden makroskopischen，histologischen und molekularen Veränderungen der Wirtszellen.为了解决整体定量蛋白质表达谱检测阶段中的间接免疫学错误，需要进行差异蛋白质分析，并建立一种基于多维色谱和质谱的分析策略。因此，蛋白质分析可以不经调节和调节而不受最佳相互作用和途径模型识别的影响。Zur Gewährleistung einer für Proteomanalysen unabdingbaren hohen Reproduzierbarkeit durch exakt definierte and gut trollierbare biologische Ausgangszustände韦尔登die holistischen Untersuchungen mit primären Milchdrüsen- Epithelzellen in恩格尔Kooperation mit dem Projekt Seyführt durchgeführt. Die so ermittelten Kandidaten Proteine韦尔登zur Prüfung der Relevanz bei in vivo Infektionen mittels von uns entwickelter peptidinduzierter Antikörper（iSEPIA Technik）an ex vivo Material（Euterbiopsien，Projekt Bruckmair）mittels ELISA bzw.免疫组化Westen blot检测。Ebenso韦尔登ausgewählte KandidatenmRNA来自蛋白质分析的补充Transkriptomansatz（Blum/Wolf项目）auf Proteinebene validiert。Zum Ende der ersten Förderperiode sollen die Ergebnisse der Proteomanalysen eine Grundlage für das molekulare Verständnis sowie innovative Diagnose- und Therapieansätze der Mastitis-Erkrankung darstellen.

Die Infektion von Gewebe mit Mastitis-Erregern führt zu schwerwiegenden makroskopischen, histologischen und molekularen Veränderungen der Wirtszellen. Im Rahmen dieses Projektes sollen die Auswirkungen unterschiedlicher Erreger in verschiedenen Phasen der Infektion auf das quantitative Protein-Expressionsprofil in holistischen, differentiellen Proteomanalysen untersucht werden, wobei eine auf multidimensionaler Chromatographie und Massenspektrometrie basierte Analysestrategie angewandt wird. Durch die Proteomanalysen sollen bislang unbekannte regulierte und regulierende Proteine unabhängig von bestehenden Interaktionshypothesen und Pathway-Modellen identifiziert werden. Zur Gewährleistung einer für Proteomanalysen unabdingbaren hohen Reproduzierbarkeit durch exakt definierte und gut kontrollierbare biologische Ausgangszustände werden die holistischen Untersuchungen mit primären Milchdrüsen- Epithelzellen in enger Kooperationen mit dem Projekt Seyfert durchgeführt. Die so ermittelten Kandidatenproteine werden zur Prüfung der Relevanz bei in vivo Infektionen mittels von uns entwickelter peptidinduzierter Antikörper (iSEPIA Technik) an ex vivo Material (Euterbiopsien, Projekt Bruckmair) mittels ELISA bzw. Westen blot getestet und gegebenenfalls immunhistochemisch lokalisiert. Ebenso werden ausgewählte KandidatenmRNAs aus dem zur Proteomanalyse komplementären Transkriptomansatz (Projekt Blum/Wolf) auf Proteinebene validiert. Zum Ende der ersten Förderperiode sollen die Ergebnisse der Proteomanalysen eine Grundlage für das molekulare Verständnis sowie innovative Diagnose- und Therapieansätze der Mastitis-Erkrankung darstellen.