Dynamische Proteomanalyse des Endometriums und korrespondierender Embryonalstadien

子宫内膜和相应胚胎阶段的动态蛋白质组分析

• 批准号: 5369997
• 负责人: Dr. Georg Josef Arnold
• 金额: --
• 依托单位: Genzentrum - Laboratorium für molekulare Biologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Units
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2001-12-31 至 2009-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5369997?language=en
• 关键词: Dynamische; Proteomanalyse; des; Endometriums; und

Für die Untersuchung und das Verständnis der embryo-maternalen Kommunikation auf molekularer Ebene sind die Substanzklassen der mRNA und der Proteine jeweils von herausragender Bedeutung. Eine Änderung des mRNA Profils einer Zelle führt dabei nicht zwingend zu korrespondierenden Änderungen des Protein-Expressionsprofils und vice versa. Für das biologische Verständnis der embryo-maternalen Kommunikation ist es daher unumgänglich, die Untersuchungen auf Ebene der Genxpression durch Analysen auf Proteinebene zu komplementieren. In diesem Teilprojekt soll das Zellmaterial aus dem ex vivo Modell (Projekt 2) auf differentiell exprimierte Proteine quantitativ untersucht werden. Hierbei wird mittels 2D-Immunoblot-Verfahren auf der Basis Peptid-induzierter Antikörper (PIA) das quantitative Expressionsmuster jener Proteine untersucht, welche mittels mRNA-basierten Techniken als Kandidaten identifiziert wurden. Die hohe Sensitivität und Selektivität der hierfür hergestellten Antiseren ermöglicht auch die Analyse niedrig exprimierter Proteine, die mittels Fluoreszenzfärbungen im Rahmen einer Gesamt-Proteom-Analyse nicht erfaßt werden können. In einem zweiten Ansatz soll das gesamte Proteom der Zellmaterialien auf quantitative Veränderungen des Expressionsprofils untersucht werden. Mit dieser Strategie sollen insbesondere jene Änderungen detektiert werden, die sich nicht in einem veränderen mRNA-Profil widerspiegeln, weil sie z.B. auf Translation-Regulation, Protein-Interaktionen oder posttranslationale Modifikationen zurückzuführen sind. Die detektierten Proteine aus diesem Ansatz sowie aus dem ebenfalls Protein-basierten Ansatz in Projekt 4 werden mit modernen massenspektrometrischen Verfahren (MALDI-TOF und Nanospray-ESI-MS-MS) identifiziert.

对于胚胎-母体的相互作用与分子水平的研究，Ebene是由mRNA和蛋白质组成的。Eine Änderung des mRNA Profils einer Zelle führt dabei nicht zwingend zu kordierenden Änderungen des Protein-Expressionsprofils，反之亦然。对于胚胎-母体的生物学检验，通过对蛋白质成分的分析来研究基因表达是非常重要的。在本项目中，采用离体模型（项目2）对Zell材料进行了差异表达蛋白质的定量研究。本文采用基于抗肽诱导剂（PIA）的2D免疫印迹法对蛋白质进行定量表达，并采用基于mRNA的方法进行鉴别。Die hohe Sensitivität und Selektivität der hierfür hergestellten Antiseren ermöglicht auch die Analyse niedrig explanerter Proteine，die mittels prozenzfärbungen im Rahmen einer Gesamt-Proteom-Analyse nicht erfaßt韦尔登können.在一个两个样本中，Zellmaterialialien的蛋白质在表达谱的定量检验中得到了韦尔登。尽管这些实验结果可以用来检测韦尔登，但它们并没有提供更广泛的mRNA表达谱，因为它们是z.B.。在翻译调控、蛋白质相互作用或翻译后修饰方面，在项目4韦尔登中，利用现代质谱法（MALDI-TOF和Nanospray-ESI-MS-MS）对基于蛋白质的抗肿瘤药物进行了蛋白质检测。

项目成果

Evidence for Estrogen-Dependent Uterine Serpin (SERPINA14) Expression During Estrus in the Bovine Endometrial Glandular Epithelium and Lumen1

• DOI: 10.1095/biolreprod.108.075184
• 发表时间: 2009-10
• 作者: S. Ulbrich;T. Frohlich;Katy Schulke;Eva Englberger;N. Waldschmitt;G. Arnold;H. Reichenbach;M. Reichenbach;E. Wolf;H. Meyer;S. Bauersachs

A newcomer's guide to nano-liquid-chromatography of peptides.

肽纳米液相色谱新手指南

• DOI: 10.1007/978-1-60761-157-8_7
• 发表时间: 2009
• 期刊: Methods in molecular biology
• 作者: Fröhlich T;Arnold GJ
• 通讯作者: Arnold GJ