Der Einfluss humaner testikulärer Peritubulärzellen auf testikuläre Stammzellen und die Stammzellnische im Hoden: Eine Analyse des «Sekretoms" und in vitro Studien

人睾丸管周细胞对睾丸干细胞和睾丸干细胞生态位的影响:“分泌组”和体外研究的分析

基本信息

项目摘要

Peritubuläre Zellen der Tubuli seminiferi sind in engem Kontakt mit Sertoli Zellen und spermatogonialen Stammzellen (SSC) auf der gegenüberliegenden Seite der Basallamina. Es wird vermutet, dass von peritubulären Zellen sezernierte Faktoren Einfluss auf die Stammzellnische und die Regulation der Spermatogenese ausüben. Ein tieferes Verständnis über die Details dieser Wirkungen fehlt bisher. Das von uns etablierte Isolierungs- und Kultursystem humaner Peritubulärzellen (HTPC) ermöglicht uns erstmalig genauer zu untersuchen, ob und auf welche Weise HTRCs die SSCs beeinflussen. Wir konnten bereits zeigen, dass HTPCs den Wachstumsfaktor GDNF produzieren, der eine Proliferation und Selbsterneuerung der SSCs bewirkt, wie in Nagetiermodellen gezeigt wurde. In den vorgeschlagenen Studien testen wir unsere Hypothese, dass HTPCs über Faktoren oder extrazelluläre Matrixproteine die Stammzellnische beeinflussen können. Das Projekt bedient sich proteomischer. morphologischer und zellulärer Methoden, und Endpunkte. (1) Der Einsatz eines modernen „Proteomics" Ansatzes ermöglicht uns die Analyse des HTPC Sekretoms, dem gesamten Spektrum aller sezernierten Proteine, welches wir für mehrere individuelle Spender von HTPCs analysieren werden. Die Resultate dieser Analyse werden durch Lokalisation von Proteinen in Schnitten von testikulären Humanbiopsien bestätigt. Mindestens fünf Proteine, die definierte Selektionskriterien erfüllen, werden weiter analysiert (siehe (2)). um den Einfluß auf SSCs zu überprüfen. Dabei wird zunächst mittels Immunhistochemie oder anderer Techniken nachgewiesen, dass SSCs spezifische Rezeptoren der identifizierten Faktoren exprimieren. (2) Der Einfluss von Faktoren aus HTPCs auf SSCs wird in Zellkulturstudien untersucht, bei denen der Effekt von konditioniertem Medium, extrazellulärer Matrix oder der direkte Kontakt von HTRCs auf SSCs in Kokultur beobachtet wird. Als homologes Modellsystem steht die humane Seminomzellinie TCam-2 zur Verfügung. Das Wachstum der Zellen wird mittels Zeitraffer-Video-Imagings aufgezeichnet und bei Abbruch der Zellkultur werden Proliferations- und Apoptoseraten sowie die Entstehung von Nicht-Seminomzellen bestimmt. Die Ergebnisse der Sektretombestimmung (1) bestimmen dann über die weiteren Details der folgenden Zellkulturexperimente. Die Zugabe zum oder die Entfernung spezifischer Faktoren aus dem Zellkulturmedium auf die humanen Keimzellen wird analysiert. (3) Da HTPCs strukturelle und funktionelle Veränderungen in infertilen Männern aufweisen, planen wir eine vergleichende Analyse des Sekretoms von HTRCs und HTRCFs, welche aus Hoden von Männern mit Spermatogenesestörungen isoliert wurden. Wir entarten, dass dieses auf humane Zellen fokussierte Projekt die Identifizierung von relevanten Faktoren aus HTPCs ermöglicht, die für die SSCs und die Initiierung der Spermatogenese von Bedeutung sind. Die erwarteten Ergebnisse haben großes Potenzial, das Verständnis zur Funktion der Stammzellnische im menschlichen Hoden zu verbessern und besitzt damit hohe medizinische Bedeutung.
精小管周围的Zellen可以通过Sertoli Zellen和精原细胞Stammzellen(SSC)在Basallamina的基础上形成。这是一个很大的问题,因为管周泽伦的行为影响了精子的发育和精子发生的调节。一个更好的理解细节的人会觉得更好。作为一个建立在人类周围环境中的隔离和文化系统(HTPC)的组织,我们首先要了解、观察和了解这些HTRC对SSC的影响。我们知道,HTPC是GDNF产生的Wachstumsfaktor,是SSC的增殖和自我调节,就像在Nagetiermodellen中所看到的那样。在我们的假设中,HTPCs是Faktoren还是Extrazelluläre MatrixProteine对Stammzellnische beeinflussen können有影响。Das Projekt bedient sich Proteomischer. morphologischer und zellulärer Methoden,und Endpunkte. (1)现代蛋白质组学的研究者们对HTPC的结构进行了分析,他们对蛋白质进行了光谱分析,并对韦尔登的分析进行了个性化的花费。最佳人体活检标本中蛋白质定位的结果分析韦尔登。Mindestens fünf Proteine,die definierte Selektionskriterien erfüllen,韦尔登weiter analysiert(siehe(2)).让他们对SSC产生影响。Dabei wird zunächst mittels Immunohistochemie or der anderer Techniken nachgewiesen,dass SSC specialised he Rezeptoren der identifizierten Faktoren exclusieren. (2)在细胞培养研究中,我们将探讨HTPCs对SSCs的影响,以及在细胞培养中,HTRCs对SSCs的直接接触对培养介质、细胞外基质的影响。所有同类模型系统均支持TCam-2的人性化半自动测试。泽伦的研究将通过泽拉费-视频-影像来增强泽伦文化的影响力,并通过泽伦文化的韦尔登解释-和凋亡来解释非泽伦文化的影响。Sektretombestimmung(1)的成果最好由Zellkultureexperimente的其他细节来完成。本文分析了Zellkulturmedium的Zugabe或Entfernung spezifischer Faktoren对人类的影响。(3)在不育男性中,HTPCs的结构和功能是非常重要的,我们计划对HTRCs和HTRCFs进行一次全面的分析,并从男性的精子发生中分离出来。我们知道,这是一个人道的Zellen fokussierte项目,用于识别来自HTPC的相关Faktoren,用于SSC和精子发生的初始化。这种认知有很大的潜力,它能使人在使用Hoden时对Stammzellnische的功能产生更大的认识,并使其在医疗上得到更大的发展。

项目成果

期刊论文数量(6)
专著数量(0)
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专利数量(0)
Human Tryptase Cleaves Pro-Nerve Growth Factor (Pro-NGF)
人类胰蛋白酶裂解前神经生长因子 (Pro-NGF)
  • DOI:
    10.1074/jbc.m111.233486
  • 发表时间:
    2011
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Spinnler K;Fröhlich T;Arnold GJ;Kunz L;Mayerhofer A
  • 通讯作者:
    Mayerhofer A
Are testicular mast cells involved in the regulation of germ cells in man?
睾丸肥大细胞是否参与人类生殖细胞的调节?
  • DOI:
    10.1111/j.2047-2927.2014.00227.x
  • 发表时间:
    2014
  • 期刊:
  • 影响因子:
    4.5
  • 作者:
    Windschüttl S;Nettersheim D;Schlatt S;Huber A;Welter H;Schwarzer JU;Köhn FM;Schorle H;Mayerhofer A
  • 通讯作者:
    Mayerhofer A
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