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Entwicklungspotenzial, epigenetischer Status, Proteomprofil und Gesundheit von Mammalieroozyten und Embryonen aus Cryopreservierung und verbesserter und mehrstufiger Follikelkultur

冷冻保存以及强化和多阶段卵泡培养的哺乳动物卵母细胞和胚胎的发育潜力、表观遗传状态、蛋白质组谱和健康状况

基本信息

批准号：
71103785
负责人：
Dr. Georg Josef Arnold
金额：
--
依托单位：
Genzentrum - Laboratorium für molekulare Biologie
依托单位国家：
德国
项目类别：
Research Units
财政年份：
2008
资助国家：
德国
起止时间：
2007-12-31 至 2015-12-31
项目状态：
已结题

来源：
https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/71103785?language=en
关键词：
Entwicklungspotenzial epigenetischer Status Proteomprofil und

项目摘要

Die Gruppe konnte im letzten Förderungszeitraum erfolgreich Entwicklung, chromosomale und epigenetische Konstitution und Proteom von in vitro gewachsenen und gereiften Eizellen aus muriner präantraler Follikelzellkultur nach Vitrifikation untersuchen; Kultur und Cryokonservierung von gespendetem humanen Material aus Ovar wurden verbessert. In der nächsten Förderperiode soll die Kultur im experimentellen Modelle der Maus (Bielefeld) und in gespendeten humanen und xeno-transplantierten humanem Gewebe (Lübeck) weiter optimiert werden durch Einbetten in Fibrin/Alginate Matrix und Mehrschrittkultur mit frischen und vitrifizierten Follikeln. Oozyten und Embryonen aus IVF sollen im Hinblick auf den Redoxzustand und Entwicklung (Bielefeld), Genexpression und Epigenom (Würzburg) und Proteom (München) analysiert werden. Einfluss von Vitrifikation auf den mitochondrialen Redoxstatus soll an lebenden Oozyten und Embryonen mittels Expression von mitochondrialem Grx1-roGFP2 bestimmt werden (Bielefeld). Um das Methylierungsmuster von cis-regulatorischen Regionen von geprägten Genen in Eizellen und Embryonen, und das Expressionsmuster in unterschiedlichen Biopsien (jeweils 5 oder weniger Zellen) der ICM und des Trophectoderms zu bestimmen, wird der neue 'limiting dilution' (LD) Assay eingesetzt, um den Erhalt und Mosacismus der Imprintmuster festzustellen; Genexpression wird mittels RT-PCR untersucht (Würzburg). Das Proteom von ganzen Follikeln, Oozyten und Embryonen aus Maus bzw. mit menschlichem Ursprung und von synchron sich in vitro entwickelnden Follikeln, soll mit Hilfe sensitiver optimierter nano-LCMS/ MS und stabilen Isotopen Markierungstechniken untersucht werden, um Stadien- und Qualitätsmarker zu identifizieren. Das Projekt zielt auf eine Verbesserung der Methoden zum Fertilitätserhalt und der Sicherheit in Assistierter Reproduktionstechnik.

Die Gruppe konnte im letzten Förderungszeitraum erfolgreich Entwicklung，染色体和表观遗传结构和蛋白质组von在体外gewachsenen和gereiften Eizellen aus muriner präantraler follikelzellculture nach玻璃化培养基；《文化与人文保护》，《文化与人文材料》，《文化与人文材料》。In der nächsten Förderperiode soll die Kultur im experimentalmodelle der Maus （Bielefeld）和In gespendeten humanen和xeno- transplantiten humanem Gewebe （l<e:1>贝克）weiter optimiert werden durch inbetten In Fibrin/Alginate Matrix和Mehrschrittkultur mit frischen和玻璃化iterten Follikeln。Oozyten und Embryonen aus IVF sollen im Hinblick auf den Redoxzustand und Entwicklung (Bielefeld), Genexpression und Epigenom (w<s:1> rzburg) and Proteom (m<e:1> nchen) analysiert werden。玻璃化诱导线粒体氧化还原状态、胚胎发育及胚胎线粒体Grx1-roGFP2表达的研究（Bielefeld）。Um das Methylierungsmuster von on -regulatorischen Regionen von geprägten Genen in Eizellen and Embryonen, und das expressionsster in terschiedlichen Biopsien (jeils 5 oder weniger Zellen) der ICM and des Trophectoderms zestimmen, and the new ‘ restricted稀释’ （LD） Assay ingesetzt, Um den Erhalt and Mosacismus der Imprintmuster festzustellen；基因表达wind mittels RT-PCR unsucht （w<s:1> rzburg）。[2]鼠胚胎发育与胚胎发育[j]。用纳米lcms / MS和稳定同位素法优化了hhilfe的灵敏度，并对其进行了研究。在辅助生殖技术方面，研究人员研究了人工授精技术Fertilitätserhalt和人工授精技术。