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Entwicklungspotenzial, epigenetischer Status, Proteomprofil und Gesundheit von Mammalieroozyten und Embryonen aus Cryopreservierung und verbesserter und mehrstufiger Follikelkultur

冷冻保存以及强化和多阶段卵泡培养的哺乳动物卵母细胞和胚胎的发育潜力、表观遗传状态、蛋白质组谱和健康状况

基本信息

批准号：
71103785
负责人：
Dr. Georg Josef Arnold
金额：
--
依托单位：
Genzentrum - Laboratorium für molekulare Biologie
依托单位国家：
德国
项目类别：
Research Units
财政年份：
2008
资助国家：
德国
起止时间：
2007-12-31 至 2015-12-31
项目状态：
已结题

来源：
https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/71103785?language=en
关键词：
Entwicklungspotenzial epigenetischer Status Proteomprofil und

项目摘要

Die Gruppe konnte im letzten Förderungszeitraum erfolgreich Entwicklung, chromosomale und epigenetische Konstitution und Proteom von in vitro gewachsenen und gereiften Eizellen aus muriner präantraler Follikelzellkultur nach Vitrifikation untersuchen; Kultur und Cryokonservierung von gespendetem humanen Material aus Ovar wurden verbessert. In der nächsten Förderperiode soll die Kultur im experimentellen Modelle der Maus (Bielefeld) und in gespendeten humanen und xeno-transplantierten humanem Gewebe (Lübeck) weiter optimiert werden durch Einbetten in Fibrin/Alginate Matrix und Mehrschrittkultur mit frischen und vitrifizierten Follikeln. Oozyten und Embryonen aus IVF sollen im Hinblick auf den Redoxzustand und Entwicklung (Bielefeld), Genexpression und Epigenom (Würzburg) und Proteom (München) analysiert werden. Einfluss von Vitrifikation auf den mitochondrialen Redoxstatus soll an lebenden Oozyten und Embryonen mittels Expression von mitochondrialem Grx1-roGFP2 bestimmt werden (Bielefeld). Um das Methylierungsmuster von cis-regulatorischen Regionen von geprägten Genen in Eizellen und Embryonen, und das Expressionsmuster in unterschiedlichen Biopsien (jeweils 5 oder weniger Zellen) der ICM und des Trophectoderms zu bestimmen, wird der neue 'limiting dilution' (LD) Assay eingesetzt, um den Erhalt und Mosacismus der Imprintmuster festzustellen; Genexpression wird mittels RT-PCR untersucht (Würzburg). Das Proteom von ganzen Follikeln, Oozyten und Embryonen aus Maus bzw. mit menschlichem Ursprung und von synchron sich in vitro entwickelnden Follikeln, soll mit Hilfe sensitiver optimierter nano-LCMS/ MS und stabilen Isotopen Markierungstechniken untersucht werden, um Stadien- und Qualitätsmarker zu identifizieren. Das Projekt zielt auf eine Verbesserung der Methoden zum Fertilitätserhalt und der Sicherheit in Assistierter Reproduktionstechnik.

[中英文摘要]Gruppe konnte im let zten Förderungszeitraum erfolgreich Entwickrun，染色体和表观遗传学Konstitution and Proteom von体外培养的gwachsenen和gereiften Eizellen Aus Muriner Präantraler Follikelzellkulturnach Vitrifikulation unteruchenen；Kulturund Cryokonservierung von gespendete Human材料Aus Ovar Wurden Veressert。在Der nächsten FörderPeride Soll De Kulture im实验模型(Bielefeld)中以及在gespendeten Humanen和异种移植中(LüBeck)，我们在纤维蛋白/藻酸盐基质和Mehrschrittkulture MIT Frischen and vitifizierten Follieln中获得了更好的结果。Oozyten and Embryonen Aus IVF Sollen im Hinblick auf den Redoxzustand and Entwickular(Bielefeld)，GenExpression and Eigenom(Würzburg)and Proteom(München)分析。Von Vitrifikation auf den线粒体氧化还原状态soll an lebenden Oozyten and Embryonen mittels表达von线粒体Grx1-roGFP 2 bstimt den(Bielefeld)。在ICM and des Trophectoderms zu bstimen，um das das metylierungsmuster von cis-Regulator ischen Regionen von geprägten Genen in Eizellen and Embryonen，das das Expressionsmuster in unterschiedlicchen Biopsien(Jeweils 5 Oder Wiger Zellen)der ICM and des Trophectoderms zu bstimen，wird der Neue‘Limit Disparation’(LD)Assay eingeingesetzt，um den Erhalent und Mosacismus der Imprint tmuster festzustellen；基因表达wird mittels RT-PCR unterucht(Würzburg)。[das Proteom von ganzen Follikeln，Oozyten and Embryonen Aus Maus bzw.MIT menschlicem Ursprung and von Synchron sich in体外Enwickelnden Follikeln，soll MIT Hilfe敏感度较高的Nano-LcMS/MS and Stablen IsotOpen Markierungstechniken untersusuht，um，and Qudidien-and Quality Marchron Sich zu Genfizieren.在Assistierter Reproduktionstechnik中，Das Projekt zielt auf eine Verbesserung der Methoden zum Fertilitätserhold and der Sinherheit.