吸引圧刺激を利用した腎臓線維芽細胞選択的遺伝子導入法による再生医療の展開

利用抽吸压力刺激将选择性基因转移至肾成纤维细胞来开发再生医学

• 批准号: 18J10186
• 负责人: 大山 奈津子
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2018
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2018-04-25 至 2020-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18J10186/
• 关键词: pDNA; 遺伝子デリバリー; 組織押圧; 組織吸引圧; 腎動脈投与; 輸尿管投与; CpG free plasmid; Hepatocyte growth factor; 腎臓

腎動脈・輸尿管投与ルートによる腎臓押圧・吸引圧遺伝子導入法の最適条件下での腎障害性について評価した。糸球体濾過機能の指標である血清クレアチニン、血中尿素窒素は、いずれの投与ルートでも変化はなかった。尿細管の指標である尿中N-acetyl-β-D-glucosaminidaseは、腎動脈投与では変化がみられなかったものの、輸尿管投与ルートでは投与から24時間後時点で一過性に上昇したが、48時間以内に正常レベルまで回復した。さらに、HE染色による組織形態変化を評価した結果、輸尿管投与では圧力刺激の有無に関わらず、投与から24時間後時点で髄質において出血、集合管の炎症、尿細管拡張が認められたが、ゲンタマイシン腹腔内投与群と比較すると僅かであった。一方、腎臓押圧・吸引圧法による遺伝子治療を実現するためには、腎線維症モデル動物における治癒・再生効果を得る必要がある。そこで、虚血再灌流から3週間経過したモデルを腎線維症マウスとして用いた。腎線維症マウスでは血管希薄化と間質線維化により分散性は若干劣るものの、間質領域の線維芽細胞、筋線維芽細胞において遺伝子発現が可能であった。経血管ルートで腎臓吸引圧法によりpCpG free hHGFを単回投与し、腎臓の治癒・再生効果を評価した。推定腎臓体積減少率に関しては、いずれの投与群でも改善がみとめられなかった。マッソントリクローム染色の結果、対照群（Sham群、吸引圧無し群、pCpG free LacZ投与群）群と比較して、pCpG free HGFを投与した吸引圧群において間質領域での細胞外マトリックスの蓄積は改善された。よって、経血管ルートでの腎臓吸引圧法によるpCpG free hHGF単回投与では、腎虚血再灌流後に腎線維化が進行したモデルマウスにおいて、腎体積減少に対する改善はみとめられなかったものの腎線維化を改善できる可能性が示された。

Renal artery, cast with ureteral ル ー ト に よ る renal perforatien and 圧, attract 圧 heritage 伝 son の import method under the condition of optimum で の renal handicap of sexual に つ い て review 価 し た. The <s:1> indicators of spheroid filtration function are である serum レアチニ レアチニ <e:1>, blood urea nitrogen <s:1>, <s:1> ずれ <s:1> and <s:1> <s:1> トで <s:1> and トで changes <e:1> な な った った. Urine tube の index で あ る urine N - acetyl - beta - D - glucosaminidase は, renal artery cast and で は variations change が み ら れ な か っ た も の の, ureteral cast with ル ー ト で は cast with か ら after 24 time point で transient に rise し た が に within time, 48 normal レ ベ ル ま で reply し た. さ ら に, HE staining に よ る - morphology change を review 価 し た result, ureteral cast and で は pressure stimulation の presence of に masato わ ら ず, cast and か ら after 24 time point で marrow qualitative に お い て bleeding, manifold の inflammation, urine tube company, zhang が め ら れ た が, ゲ ン タ マ イ シ ン intra-abdominal vote compared with group of と す る と only か で あ っ た. Side, kidney, viscera and 圧 attract 圧 に よ る heritage 伝 を son treatment be presently す る た め に は, renal line d モ デ ル animal に お け る cure, renewable fruit comes unseen を る necessary が あ る. Youdaoplaceholder0 で で, reperfusion of deficient blood ら ら for 3 weeks to pass through <s:1> たモデ を を renal line disease ウスと ウスと て use そ た. Disease of kidney line d マ ウ ス で は と interstitial line dimensions of blood vessels and thinning に よ り dispersion は several bad る も の の, interstitial の line d line d bud of the bud cells, muscle cells に お い て heritage 伝 son 発 が may now で あ っ た. Vascular <s:1> トで renal aspiration and compression によ <s:1> pCpG free hHGFを単 reinfusion and the effect of <s:1> and renal tissue healing and regeneration を evaluation 価 た た た. The presumed rate of renal volume reduction is に related to て て, に ずれ and で で improvement がみとめられな った った. マ ッ ソ ン ト リ ク ロ ー の ム dyeing results, according to the group of seaborne (Sham group, attract 圧 し group, LacZ pCpG free throw and group) group of と compare し て, pCpG free HGF を cast with し た attract 圧 group に お い て interstitial area で の extracellular マ ト リ ッ ク ス の accumulation は improve さ れ た. よ っ て, 経 vascular ル ー ト で の kidney is crucial to attract 圧 method に よ る pCpG free hHGF 単 cast back and で は, kidney and blood perfusion after に renal line d turn が し た モ デ ル マ ウ ス に お い て reduced in volume, renal に す seaborne る improve は み と め ら れ な か っ た も の の renal line dimensions を improve で き が る possibility in さ れ た.

项目成果

多色深部イメージングを利用したエレクトロポレーション法による腎臓内遺伝子発現空間分布の評価

利用多色深度成像电穿孔法评估肾脏基因表达的空间分布

• 发表时间: 2018
• 作者: 大山奈津子;川口真帆;高比良慎;鶴丸雅子;萩森政頼;川上 茂
• 通讯作者: 川上 茂

輸尿管投与による腎臓へのin vivo遺伝子導入における外来遺伝子発現分布の評価

通过输尿管给药体内基因转移至肾脏过程中外源基因表达分布的评估

• 发表时间: 2018
• 作者: 大山奈津子;川口真帆;高比良慎;鶴丸雅子;萩森政頼;川上 茂
• 通讯作者: 川上 茂