ヘマグルチニンの抗原性多様化に対応可能なカクテル型インフルエンザワクチンの開発

开发可响应血凝素抗原多样化的鸡尾酒流感疫苗

• 批准号: 22K10517
• 负责人: 後川 潤
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kawasaki Medical School
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K10517/
• 关键词: インフルエンザウイルス; ヘマグルチニン; N型糖鎖; ワクチン; カクテルHA抗原; リコンビナントタンパク質; 抗原カクテル

インフルエンザは、人々の健康だけでなく社会活動にも影響を及ぼす深刻な感染症である。A型インフルエンザウイルスは、ウイルス表面タンパク質であるヘマグルチニン（hemagglutinin:HA）とノイラミニダーゼ（neuraminidase:NA）の種類によって亜型に分類される。A型株である2009年パンデミック型（H1N1pdm亜型）と香港型（H3N2亜型）のうち、香港型ウイルスは抗原変異頻度が特に高いため、流行株を予測して適切なワクチン株を選定することは難しい。殊に国内で承認されているインフルエンザワクチンは、その防御効果が主要抗原タンパク質であるHAの抗原性に左右される側面が大きく、ワクチン株と市中流行株の抗原相同性がずれた場合、ワクチンとしての有益性が損なわれる。本研究では抗原性のズレに対応できるHAワクチンへの改良を目的として、HAの主要抗原部位のアスパラギン結合型（N型）糖鎖に着目してN型糖鎖プロファイル（組合せと数）と抗原性との関係を明らかにし、抗原カクテル化によるHAワクチンの改良とその有効性を検証した。本年度は以下の実験を遂行した。①主要抗原部位のN型糖鎖プロファイルが異なるように設計したHA遺伝子を組み込んだプラスミドを構築し、HEK293T細胞に導入してリコンビナントHAタンパク質（rHA）を発現させた。②免疫沈降法で回収したN型糖鎖プロファイルが異なる3種類のrHAを混ぜてカクテルHA抗原とし、モルモットに免疫した。③得られた抗血清を用いて赤血球凝集抑制試験等を行い、単一HA抗血清とカクテルHA抗血清の性能を比較検証した。その結果、カクテルHA抗原によって得られた抗血清は、単一HA抗原によって得られた血清よりも広域かつ強い中和活性を示す傾向が認められた。

イ ン フ ル エ ン ザ は, 々 の health だ け で な く social activities に も influence を and ぼ す deep な adapting just-in-time inventory で あ る. Type A イ ン フ ル エ ン ザ ウ イ ル ス は, ウ イ ル ス surface タ ン パ ク qualitative で あ る ヘ マ グ ル チ ニ ン (hemagglutinin: HA) と ノ イ ラ ミ ニ ダ ー ゼ (neuraminidase: NA) の species に よ っ て 亜 type classification さ に れ る. Type A strain で あ る 2009 パ ン デ ミ ッ ク type (H1N1pdm 亜 type) と Hong Kong type (H3N2 亜 type) の う ち, Hong Kong ウ イ ル ス は antigen - different frequency が に い tall た め, epidemic strains を be し て appropriate な ワ ク チ ン を strains selected す る こ と は difficult し い. Different に domestic で admitted さ れ て い る イ ン フ ル エ ン ザ ワ ク チ ン は, そ の defense services fruit が main antigen タ ン パ ク qualitative で あ る HA の antigenicity に around さ れ る が side big き く, ワ ク チ ン strains と city gay が antigen of epidemic strains の phase in the ず れ た occasions, ワ ク チ ン と し て の is healthy が loss な わ れ る. This study で は antigenicity の ズ レ に 応 seaborne で き る HA ワ ク チ ン へ の improved を purpose と し て main antigen part, HA の の ア ス パ ラ ギ ン combination lock type (N) sugar に with mesh し て N sugar lock プ ロ フ ァ イ ル (combination せ と) と antigenicity と の masato を and Ming ら か に し, antigen カ ク テ ル change に よ る HA ワ ク チ ン の improved と そ の have sharper Sex を検 certifies た. For the current year, た the following を experiences を carried out た. (1) the main antigen part の N sugar lock プ ロ フ ァ イ ル が different な る よ う に design し た HA heritage 伝 son を group み 込 ん だ プ ラ ス ミ ド を constructing し, HEK293T cells に import し て リ コ ン ビ ナ ン ト HA タ ン パ ク mass (rHA) を 発 now さ せ た. (2) the method of immune sink で back 収 し た N sugar lock プ ロ フ ァ イ ル が different な る 3 kinds の rHA を mixed ぜ て カ ク テ ル HA antigen と し, モ ル モ ッ ト に immune し た. (3) to ら れ た antiserum を with い て red blood cell agglutination inhibition test line を い, a HA 単 antiserum と カ ク テ ル HA antiserum の を performance comparison 検 card し た. そ の results, カ ク テ ル HA antigen に よ っ て have ら れ た antiserum は, 単 a HA antigen に よ っ て have ら れ た serum よ り も hiroo domain か つ strong い neutralizing activity を す tendency in が recognize め ら れ た.

项目成果

川崎医科大学微生物学教室

川崎医科大学微生物学系