Elucidation of the localization and the role of O-GlcNAc-modified actin and phosphorylated actin in the nucleus

阐明 O-GlcNAc 修饰肌动蛋白和磷酸化肌动蛋白在细胞核中的定位和作用

• 批准号: 22K06816
• 负责人: 秋元 義弘
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kyorin University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06816/
• 关键词: アクチン; 糖修飾; O-GlcNAc; リン酸化; 腎糸球体; 核

アクチンは細胞骨格成分としての機能がよく知られているのに加えて、近年、核内において転写などの調節に関与することが明らかになりつつある。 アクチンは、リン酸化、糖修飾（O-GlcNAc化）、ユビキチン化、SUMO化、アセチル化など様々な翻訳後修飾を受ける。アクチンの糖修飾（O-GlcNAc化）部位は6ヶ所あり、そのうち3ヶ所（Ser 52, 199, 323）はリン酸化部位と一致していることが明らかになっているが、これらの部位の糖修飾が、アクチンの機能の調節にどのように関与しているについては不明である。核の内部には、クロマチンや核マトリクスの他に、核内構造体とよばれるRNAとRBP（RNA結合タンパク質）から構成される機能的な集合体が存在する。核内構造体では転写、RNAプロセシング、RNAエディティングなど様々なRNAの転写制御が行われている。核内構造体の主なものは、核小体、カハール体、核スペックル、パラスペックル、PML体、Gemがあり、それぞれ機能が異なることが知られている。本年度は、糖修飾アクチンの核内における役割について調べる目的で、糖修飾(O-GlcNAc化Ser199)アクチン抗体と核内構造体に対するマーカータンパク質抗体を用いて、免疫組織化学的方法と免疫沈降法により糖修飾アクチンがこれらの核内構造体のどれに局在するかを検討した。その結果、ラット腎糸球体の核において糖修飾アクチンが核スペックルに局在するserine and arginine rich splicing factor 3 (SRSF3)と共局在していることが明らかになった。さらに、糖修飾アクチン抗体による免疫沈降産物を用いてWestern blottingを行ったところ、糖修飾アクチンとSRSF3の結合性が確認された。SRSF3 は、転写、RNA プロセッシングやタンパク質の翻訳などさまざまな機能を担っていることが明らかになっている。以上のことから、糖修飾アクチンが核スペックルにおいてSRSF3と相互作用してこれらの機能を調節することが推測された。

ア ク チ ン は cells bone composition と し て の function が よ く know ら れ て い る の に plus え て, in recent years, nuclear に お い て planning write な ど の adjust に masato and す る こ と が Ming ら か に な り つ つ あ る. ア ク チ ン は, リ ン acidification, sugar modifications (O - GlcNAc), ユ ビ キ チ ン, SUMO, ア セ チ ル change な ど others 々 な modification after turn 訳 を by け る. Youdaoplaceholder0 チ チ チ ヶ site of sugar modification (O-GlcNAc) チ 6ヶ institute あ ヶ, そ うち うち3ヶ (Ser 52, 199) 323) は リ ン acidification parts と consistent し て い る こ と が Ming ら か に な っ て い る が, こ れ ら の の parts modified が sugar, ア ク チ ン の function の adjust に ど の よ う に masato and し て い る に つ い て は unknown で あ る. Nuclear の internal に は, ク ロ マ チ ン や nuclear マ ト リ ク ス の he constructs in に, nuclear と よ ば れ る RNA と RBP (rna-binding タ ン パ ク qualitative) か ら constitute さ れ る functionary な aggregation が existence す る. Core constructs で は planning to write, RNA プ ロ セ シ ン グ, RNA エ デ ィ テ ィ ン グ な ど others 々 な RNA の planning write suppression が line わ れ て い る. Core constructs の main な も の は, nucleosome, カ ハ ー ル body, nuclear ス ペ ッ ク ル, パ ラ ス ペ ッ ク ル, PML, Gem が あ り, そ れ ぞ れ function が different な る こ と が know ら れ て い る. は this year, sugar, modified ア ク チ ン の intranuclear に お け る service cut に つ い て adjustable べ る purpose で, sugar modifications (O - GlcNAc Ser199) ア ク チ ン antibody と core constructs に す seaborne る マ ー カ ー タ ン パ ク quality antibody を い て and immunohistochemical methods と immune sink に よ り sugar modified ア ク チ ン が こ れ ら の core constructs の <s:1> れに is at する する を検 を検 for する た. そ の results, ラ ッ ト renal si sphere の nuclear に お い て sugar modified ア ク チ ン が nuclear ス ペ ッ ク ル に bureau in す る serine and arginine rich splicing factor 3 (SRSF3) と total bureau in し て い る こ と が Ming ら か に な っ た. さ ら に, sugar, modified ア ク チ ン antibody に よ る を immune sink products with い て Western blotting を line っ た と こ ろ, sugar, modified ア ク チ ン と SRSF3 の associativity が confirm さ れ た. SRSF3 は, planning write, RNA プ ロ セ ッ シ ン グ や タ ン パ ク qualitative の turn 訳 な ど さ ま ざ ま な function を bear っ て い る こ と が Ming ら か に な っ て い る. Above の こ と か ら, sugar, modified ア ク チ ン が nuclear ス ペ ッ ク ル に お い て SRSF3 と interaction し て こ れ ら の function を regulating す る こ と が speculation さ れ た.

项目成果

Essentials of Glycobiology. 4th edition

糖生物学要点。

• 发表时间: 2022
• 作者: Zachara NE;Akimoto Y;Boyce M;Hart GW
• 通讯作者: Hart GW

Comp Carbohyd Res Ctr, Univ. Georgia(米国)

佐治亚大学Comp Carbohyd Res Ctr（美国）

Exploring the pathophysiological mechanism of interstitial edema focusing on the role of macrophages and their interaction with the glycocalyx.

探索间质性水肿的病理生理机制，重点关注巨噬细胞的作用及其与糖萼的相互作用。

• DOI: 10.1016/j.job.2023.01.001
• 发表时间: 2023
• 期刊: J Oral Biosci
• 影响因子: 2.4
• 作者: Nishida R;Suzuki D;Akimoto Y;Matsubara S;Hayakawa J ;Ushiyama A;Sasa K;Miyamoto Y;Iijima T;Kamijo R
• 通讯作者: Kamijo R

糖修飾β-アクチンの核内における局在.

糖修饰的 β-肌动蛋白在细胞核中的定位。

• 发表时间: 2023
• 作者: 秋元義弘;三浦ゆり;宮東昭彦; Gerald W Hart;遠藤玉夫
• 通讯作者: 遠藤玉夫