表皮基底膜形成過程における内在性β-ガラクトシド結合性レクチンの発現

表皮基底膜形成过程中内源性β-半乳糖苷结合凝集素的表达

• 批准号: 06770020
• 负责人: 秋元 義弘
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Kyorin University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770020/
• 关键词: 内在性β-ガラクトシド結合性レクチン; ニワトリ胚; 表皮; 基底膜; VitaminA; 細胞外マトリックス

今回、14kD-レクチンのニワトリ胚真皮における局在をin vivo並びにin vitro系を用いて組織化学的に検討した。ニワトリ胚(孵卵13、15、17、20日齢)脚部の皮膚を、4%ホルムアルデヒドで室温、1時間固定後、2.3Mショ糖に浸漬し、凍結準超薄切片を作製し、抗14K-レクチン抗体と反応させ、螢光法にて局在部位を光顕的に観察した。また孵卵13日ニワトリ胚脚部より皮膚を採取、ハイドロコーチゾン(HC,10^<-8>M)あるいはレチノール(20μg/ml)を添加した培地にて培養した後、同様に処理した。また電顕観察には、前固定後、Lowicryl k4m包埋超薄切片を作製、抗14K-レクチン抗体を作用させ、コロイド金を用いた間接標識法により結合部位を可視化した。ニワトリ胚(孵卵13日齢)の未分化な皮膚(脚部)をEDTA(0.4%,37℃、30分間)またはDispase(1000 units/ml、37℃、30分間)処理により表皮と真皮とを分離し、基底膜を除去する。このようにして得た表皮と真皮とを再結合し、ミリポアフィルターに貼り付け、合成培養液(BGJb)にて培養し、上記と同様の方法にて14kD-レクチンの局在を経時的に観察した。光顕的に観察すると、in ovo,in vitro系いずれの場合にも、未分化の皮膚では真皮における反応は微弱であった。表皮の角化に伴って真皮の反応が増強した。またretinol投与により粘液化生を来した表皮では、14kD-レクチンの発現は抑制されるのに対し、真皮では発現は抑制されなかった。電顕的には基底膜、細胞外基質、一部の線維芽細胞の細胞質と核に陽性反応が見られた。表皮真皮再結合実験より基底膜形成過程において14kD-レクチンは真皮のほとんどの線維芽細胞において産生され、早い時期から基底膜の形成に預かることが明らかになった。以上の結果から真皮における14kD-レクチンは皮膚の分化に伴ってその発現が変化し、また基底膜の形成過程に関与することが示唆された。

This time, 14kD-レクチンのニワトリembryonic dermis is produced in vivo and in vitro using histochemistry.ニワトリEmbryos (hatched on 13th, 15th, 17th, 20th day) Foot skin, 4% ホルムアルデヒドで, room temperature, 1 time fixed, 2.3M Sugar impregnation, frozen quasi-ultrathin section production, anti-14K-レクチン antibody reaction, fluorescence method and localized photodetection. On the 13th day of the incubation of the eggs, the skin of the embryonic leg of the embryo was collected, and the skin of the embryo was harvested, and the skin of the embryo was harvested, and the skin of the embryo was harvested, and the skin was harvested (HC, 10^<-8> M) あるいはレチノール(20μg/ml)をadded した聫てcultivated and treated with 様にした.また电馳観看には, anterior and posterior fixation, Lowicryl k4m embedded ultrathin sections were prepared, and the anti-14K-レクチン antibody was used to detect its effects. The binding site of the コロイド金を was visualized using the indirect labeling method.ニワトリEmbryos (hatched 13 days ago) undifferentiated skin (foot) をEDTA (0.4%, 37℃, 30 minutes) またはDispase (1000 units/ml, 37°C, 30 minutes), the epidermis and dermis are separated and the basement membrane is removed.このようにして得たepidermis and dermisとをrecombinationし,ミリポアフィルターにstickerりpayけ, synthetic culture medium ( BGJb) にてcultivationし、Same method as mentioned above にて14kD-レクチンのbureau was in を経. The skin is smooth, the skin is in ovo, the skin is in vitro, the skin is undifferentiated, the skin is weak, and the skin is weak. The keratinization of the epidermis is accompanied by the reaction and strengthening of the dermis.またretinol administration によりmucus metaplasia をしたepidermis では、14kD-レクチンの発appears and suppresses it, and the dermal skin appears and suppresses it. The basement membrane, extracellular matrix, cytoplasm and nucleus of a part of the fibroblast cells of the electrode are positive for the reaction. The epidermis and dermis are rejoined and the basement membrane is formed. Line-dimensional bud cells are produced and the basement membrane is formed in the early stage. The results of the above are the results of the dermal skin differentiation 14kD-レクチンはskin differentiationに与ってThe process of formation of the basilar membrane and the formation process of the basilar membrane are related to the change of the appearance and the formation process of the basilar membrane.