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熱帯熱マラリア原虫生殖母体期の感染赤血球における細胞接着機構の解析

恶性疟原虫配子体阶段感染红细胞的细胞粘附机制分析

基本信息

批准号：
22K07040
负责人：
入子英幸
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Kobe University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

熱帯熱マラリア患者の末梢血中には、リング期と成熟生殖母体が検出される。赤血球侵入24時間以降の無性生殖期では、感染赤血球表面にはknobと呼ばれる凸構造が形成され、PfEMP1などの接着分子が発現し血管内皮細胞との接着が起こる。これに対し生殖母体期では、感染赤血球にknobが形成されずPfEMP1の発現もほとんど確認されないが、未成熟生殖母体が骨髄に集積することが報告されている。そのため、感染者体内における未成熟生殖母体の挙動は、無性生殖期とは異なる分子機構に起因すると予想されるが、生殖母体期の原虫タンパク質輸送の詳細は明らかにされておらず、生殖母体感染赤血球表面の接着分子も同定されていない。本研究では、感染赤血球膜近傍に形成されるMaurer's cleftと呼ばれる膜構造に局在し、PfEMP1などの接着分子の輸送に関与するSBP1（skeleton binding protein 1)に着目し、生殖母体期におけるSBP1の発現時期および分子局在を解析した。SBP1抗体を用いた間接蛍光抗体法およびウエスタンブロットを行ったところ、生殖母体期のSBP1はステージ１から５の全てに発現することが明らかとなった。さらに、免疫電顕法による詳細な分子局在の解析を行ったところ、ステージ3以降ではLaveran's bib（感染赤血球の辺縁部）に集積したMaurer's cleftに局在することが明らかになった。また、生殖母体期の原虫タンパク質輸送におけるSBP1の機能を明らかにするためにCRISPR-Cas9システムを用いてsbp1遺伝子欠損原虫を作出した。

The heat of the hot zone occurs in the に and リグググ of the と mature reproductive mother が検 of the ラリア patient 's peripheral blood. Red blood cell into 24 time onwards の asexual reproductive では, infected red blood cell surface には knobs と shout ばれるが convex structure formation され, PfEMP1 などの then molecular が発 now し endothelial cells との since then がこる. これにし seaborne reproductive phase matrix では, infected red blood corpuscle に knobs が form されず PfEMP1 の発 now もほとんど confirm されないがが bone marrow, immature reproductive matrix に set product することが report されている. そのため, people infected with the AIDS virus における immature reproductive maternal の挙は, asexual reproductive とは different なる molecular institutions に cause すると to think されるが, reproductive phase matrix の parasite タンパク mass transport の detailed は Ming らかにされておらずの then infected red blood cell surface molecules, reproductive matrix も be されていない. This study では, infected red blood cell membrane nearly alongside に form される Maurer 's cleft と shout ばれる membrane structure に bureau in し, PfEMP1 などの then molecular の conveying に masato and する SBP1 (skeleton binding protein 1)に target に, reproductive maternal stage におけるSBP1 stage occurrence period および molecular localization を analysis たた. を SBP1 antibody with いた蛍 indirect light antibody technique およびウエスタンブロットを line ったところ, reproductive phase matrix の SBP1 はステージ 1 から 5 の full てに発 now することが Ming らかとなった. さらに, immune 顕 method による detailed な molecular bureau on line analytical をのったところ, ステージ 3 onwards では Laveran 's bib (infected red blood corpuscle の辺 try) に set product した Maurer' s cleft に bureau in することが Ming らかになった. また, reproductive phase matrix の parasite タンパク mass transport における SBP1 の function を Ming らかにするために CRISPR - Cas9 システムを with いて SBP1 heritage 伝 son owe damage of parasite を make した.