食道扁平上皮癌がん幹細胞における免疫逃避機構の解明

阐明食管鳞癌干细胞的免疫逃逸机制

• 批准号: 22K08000
• 负责人: 夏井坂 光輝
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08000/
• 关键词: 癌幹細胞; 食道扁平上皮癌; 免疫チェックポイント阻害剤

本邦においてもESCCに対して免疫チェックポイント阻害剤（nivolumab、pembrolizumab）が臨床の現場で使用可能となった。我々はこれまでの豊富なESCCに関する実験データ（DNAマイクロアレイ）、ESCC癌幹細胞のサンプルを用いて解析を行ったところ、CD24low/CD44high癌幹細胞においてPD-L1、PD-L2の発現が有意に増加していることを確認した。さらに、FGFR/Erk経路阻害剤（trametinib）により一部のCD24low/CD44high癌幹細胞は減少し、治療抵抗性は回復するが、残存したCD24low/CD44high癌幹細胞ではPD-L1、PD-L2の発現が有意に増加していた。FGFR/Erk経路阻害剤であるtrametinibと抗PD-1抗体の併用療法がESCC癌幹細胞を標的とした有効な新規治療法となり得る可能性が期待される。本研究はESCC癌幹細胞におけるPD-L1、PD-L2の発現調節機構の解明、免疫チェックポイント阻害剤の効果を3次元培養、オーガノイド、マウス発癌モデルを用いて詳細に検証することを目的に遂行される。さらに、免疫チェックポイント阻害剤とFGFR/Erk経路阻害剤の併用療法の可能性をマウス発癌モデルにより検証する令和4年度は複数のESCC細胞株（TE8、TE11、HCE4、T-TeRAS）を用いてオーガノイドを作成した。オーガノイドからCD24low/CD44high癌幹細胞と非癌幹細胞をセルソーターにより分離し、PD-L1、PD-L2の発現を確認したところ、CD24low/CD44high癌幹細胞においてPD-L1及びPD-L2の発現は有意に上昇していた。EMTを促進するTGF-β1、FGF2により処理した細胞ではCD24low/CD44high癌幹細胞が増加し、同実験系においてもPD-L1、PD-L2の発現が有意に増加した。ただ、TGF-β阻害剤の短期間の処理（48時間）ではCD24low/CD44high癌幹細胞におけるPD-L1、PD-L2の発現に有意な変化は認められなかった。

In this country, the use of ESCC inhibitors (nivolumab, pembrolizumab) in the field of clinical use may be possible. We confirm that the expression of PD-L1 and PD-L2 in CD24 low/CD44 high cancer stem cells is intentionally increased. In addition, FGFR/Erk pathway inhibitor (trametinib) results in a decrease in CD24 low/CD44 high cancer stem cells, a recovery in treatment resistance, and an intentional increase in the presence of PD-L1 and PD-L2 in CD24 low/CD44 high cancer stem cells. FGFR/Erk pathway inhibitor therapy with trametinib and anti-PD-1 antibody targeting ESCC cancer stem cells is expected to have the potential for new therapies. This study aimed to elucidate the regulatory mechanisms of PD-L1 and PD-L2 in ESCC cancer stem cells, and to investigate the effects of three-dimensional culture, selection, and development of cancer stem cells. In addition, the possibility of combination therapy with immune inhibitors and FGFR/Erk pathway inhibitors has been established for multiple ESCC cell lines (TE8, TE11, HCE4, T-TeRAS) in 2004 and 2005. CD24 low/CD44 high cancer stem cells and non-cancer stem cells were isolated and PD-L1 and PD-L2 were identified. CD24 low/CD44 high cancer stem cells were identified and PD-L1 and PD-L2 were identified. EMT promotes the growth of CD24 low/CD44 high cancer stem cells in cells treated with TGF-β1 and FGF2, and the expression of PD-L1 and PD-L2 in the same line is intentionally increased. The short-term treatment (48 hours) of TGF-β inhibitor caused CD24 low/CD44 high cancer stem cells to develop PD-L1 and PD-L2.