象牙芽・エナメル芽細胞標識マウスの象牙質及びエナメル質形成不全の構造と遺伝子解析

成牙本质细胞/成釉细胞标记小鼠牙本质和牙釉质发育不全的结构和遗传分析

基本信息

  • 批准号:
    22K09901
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.66万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
  • 财政年份:
    2022
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2022-04-01 至 2025-03-31
  • 项目状态:
    未结题

项目摘要

我々は象牙芽細胞及びエナメル芽細胞を別々の蛍光で標識し、象牙芽細胞やエナメル芽細胞を単離、同定するために象牙芽細胞特異的遺伝子dentin sialophosphoprotein及びエナメル芽細胞特異的遺伝Amelogenin-Xの遺伝子座に蛍光タンパクを挿入した遺伝子組換えマウスを作製した。これらのマウスは象牙芽細胞及びエナメル芽細胞を別々の蛍光で標識できることに加え 、象牙質形成不全やエナメル質形成不全を示した。そこで、象牙芽細胞やエナメル芽細胞がこれらの疾患にどのように関わり、どのような遺伝子発現変化や性状変化を示すか、組織切片、micro-CT、走査型電子顕微鏡やRamanレーザー顕微鏡等を用いて象牙質の構造変化について検討した。[1] マイクロCT、走査型電子顕微鏡、Ramanレーザー顕微鏡等を用いてAMELX欠損、DSPP欠損、両欠損したマウスのエナメル質及び象牙質の硬度や性状解析を行ない、特にDSPP欠損マウスの象牙質で基質の変化が起きていることがわかった。[2]上記の3種類のマウスのエナメル質および象牙質の硬度変化が修復象牙質によるか、骨様組織によるか或はエナメルmatrix分泌異常によるかを明らかにする為に蛍光標識された象牙芽細胞と象牙質をDSPP, DMP, OPN, BSP, AMBN等の抗体を用いて組織学的に検討し、その違いを明らかにした。[3]上記3種類のマウスの象牙質の硬度変化が発生時の象牙芽細胞やエナメル芽細胞の遺伝子発現変化に起因するかを調べるために、歯髄を単離し、リアルタイムPCR法にて硬組織関連遺伝子、dentin matrix、enamel matrixタンパク関連遺伝子の発現を検討し、違いを明らかにした。[4] Tamoxifen投与にて象牙芽細胞特異的にCreを発現できるマウスとCre-LoxPによりジフテリア毒素受容体(DTR)遺伝子を発現誘導できるマウスを用いて象牙芽細胞を消失させた際の2次象牙質誘導の有無と象牙質の硬さについてマイクロCT 解析及び凍結切片を用いた解析を開始した。
We identify ivory bud cells and their differentiation by light, isolate and identify ivory bud cells, identify ivory bud cell-specific genes, dentin sialophosphoprotein, and control ivory bud cell-specific genes, Amelogenin-X gene loci. The difference between ivory bud cells and ivory bud cells is marked by the presence of an incomplete dentin formation and an incomplete dentin formation. The structural transformation of dentin was studied by means of histological section, micro-CT, scanning electron microscope, Raman microscope, etc. [1]The hardness and properties analysis of AMELX, DSPP and Dentin are performed by using CT, scanning electron microscope, Raman microscope, etc. [2]The above three types of dentin and ivory hardness change, repair of dentin, bone tissue, or abnormal secretion of matrix, are identified by light for identification of ivory bud cells and dentin, DSPP, DMP, OPN, BSP, AMBN, etc., and histological examination and other violations. [3]The above three types of dentin hardness changes during the development of ivory bud cells and ivory bud cells are described. The causes of gene development in ivory bud cells are discussed in detail. The development of hard tissue-related genes, dentin matrix and enamel matrix is discussed in detail by PCR. [4]Tamoxifen injection and ivory bud cell-specific Cre detection and induction of toxin receptor (DTR) gene in ivory bud cells-induced secondary dentin induction and dentin hardness analysis and frozen section analysis

项目成果

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专利数量(0)
Neural crest-derived mesenchymal cells support thymic regeneration after lethal irradiation
神经嵴来源的间充质细胞支持致命辐射后胸腺再生
  • DOI:
  • 发表时间:
    2022
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Doris Narki Tetteh;Hidetoshi Yamazaki;Mari Hikosaka-Kuniishi
  • 通讯作者:
    Mari Hikosaka-Kuniishi
Isolation of CD35+ follicular dendritic cells and its role in the differentiation from B cells to IgA+GL7+ cells
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  • DOI:
    10.1016/j.imlet.2022.02.005
  • 发表时间:
    2022
  • 期刊:
  • 影响因子:
    4.4
  • 作者:
    Hikosaka-Kuniishi M;Yamane T;Isono K;Tetteh DN;Yamazaki H
  • 通讯作者:
    Yamazaki H
ホームページ 三重大学 基礎医学系講座 幹細胞発生学
主页 三重大学基础医学部干细胞胚胎学
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
エナメル質形成不全症様を呈すAmelex‐TdTomatoマウス及び象牙質形成不全症様を呈すDspp-GFPマウスの象牙質の性状分析
分析表现出牙釉质发育不全样症状的 Amelex-TdTomato 小鼠和表现出牙本质发育不良样症状的 Dspp-GFP 小鼠的牙本质特性
  • DOI:
  • 发表时间:
    2022
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    磯野加奈;松山加乃;山崎英俊
  • 通讯作者:
    山崎英俊
Multiple cell populations generate macrophage progenitors in the early yolk sac
  • DOI:
    10.1007/s00018-022-04203-7
  • 发表时间:
    2022-03-01
  • 期刊:
  • 影响因子:
    8
  • 作者:
    Ito, Chie;Hikosaka-Kuniishi, Mari;Yamane, Toshiyuki
  • 通讯作者:
    Yamane, Toshiyuki
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  • 通讯作者:
    山崎 英俊

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