触媒機能を有するディノボ人工タンパク質の創製は可能か?
是否有可能制造出具有催化功能的dinovo人造蛋白?
基本信息
- 批准号:08878087
- 负责人:
- 金额:$ 1.34万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Exploratory Research
- 财政年份:1996
- 资助国家:日本
- 起止时间:1996 至 1998
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
4本のα-へリックス鎖を束ねた4α-へリックスバンドル構造体の4本のα-へリックスをつなぐ2つのループ部分に1組ずつのグルタミン酸とヒスチジンを配置した人工タンパク質を合成し、この立体構造および加水分解活性を評価した。2個のカルボキシル基と2個のイミダゾールがこの人工タンパクが4α-ヘリックスバンドルを形成するときにバンドル上面に集まり、触媒活性を発揮できるように設計した。合成した1本鎖63-ペプチド(63-HEHE)はCD測定の結果リン酸緩衝液中でα-ヘリックス構造となった。Zn^<2+>イオン添加によってヘリックス性が変化することから、バンドル上面の触媒活性部位に金属イオンを結合することが可能であることがわかった。さらに63-HEHEは緩衝液中p-ニトロフェニルエステルを加水分解し、疎水性の長鎖アルキル基を持つ基質に対して高活性を示した。また、人工ペルオキシダーゼを目標とした人工タンパク質の合成と評価を行った。この人工タンパク質はβ構造とα-ヘリックスとを交互に並べたβαβα構造体であり、はじめのβ構造部分に鉄ポルフィリンを配し、α-ヘリックス部分にヒスチジンを配することによってペルオキシダーゼ活性を持つよう設計したものである。合成はオキシム樹脂固相合成・セグメント縮合法によって行った。ペルオキシダーゼ活性の評価は、酸化剤として過酸化水素、クメンハイドロパーオキサイド、t-ブチルハイドロパーオキサイド、リノール酸過酸化物を用い、ポルフィリンによってMCDPが酸化されることによる可視吸光を測定することによって行った。リノール酸過酸化物を酸化剤として用いた場合が最も活性が高い結果が得られた。細長く疎水性の高いリノール酸過酸化物が活性部位を含む内部疎水場に最も入りやすかったためと考えられる。
4 α-C_2H_2O_3-C_2H_2O_3-C_2O_3-C_2H_2O_3-C_2O_2O_3-C_2O_2O_2O_3-C_2O_2-C_2O_2O_2O_3-C_2O_2O_2O Two of the four groups are designed for the formation of a 4 alpha-3 alpha-4 alpha-3 alpha-3 alpha-4 alpha-3 alpha-4 alpha-3 alpha-3 alpha-4 alpha-4 alpha-3 alpha-4 alpha-4 Synthesis of 63-HEHE (63-HEHE) and determination of CD in acid buffer Zn^<2+> is added to the catalyst and the active site of the catalyst is combined with the metal. 63-HEHE shows high activity by hydrolysis of p-nitrocellulose in buffer solution and by long chain reaction of aqueous solution. The purpose of the artificial selection is to evaluate the quality of the product. The artificial beta structure and the interaction between the alpha and beta alpha alpha structures are designed to be able to maintain the interaction between the alpha and beta structures. Synthesis of resin by solid-phase synthesis Evaluation of the activity of MCDP: Acidification: Determination of the visible absorbance of MCDP: Acidification: Determination of the visible absorbance of MCDP: Determination of the visible absorbance of MCDP: Determination of the visible absorbance of MCDP The acid content of the product is very high. The active site of the acid peracidifier is contained in the internal water field.
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
K.Tomizaki: "Substrate specificities of artificial flavo-enzymes" Peptides,the Proceedings of the First International Peptide Symposium. 1・1(in press). (1998)
K. Tomizaki:“人工黄素酶的底物特异性”肽,第一届国际肽研讨会论文集 1·1(印刷中)。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
N.Nishino,H.Sasaki,K.Kaneko,T.Uchida,T.Fujimoto: "Design of βαβα-Structure of Polypeptide with Pyrene,Flavin,and Porphrin Functions" Peptides 1996,Proceedings of 24th Eurorpean Peptide Symposium. 1996(in press). (1997)
N. Nishino、H. Sasaki、K. Kaneko、T. Uchida、T. Fujimoto:“具有芘、黄素和卟啉功能的多肽的 βαβα 结构的设计”肽 1996 年,第 24 届欧洲肽研讨会论文集 1996 年(第 24 届欧洲肽研讨会论文集) (1997)
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Y.Tanaka,H.Akisada,T.Fujimoto,N.Nishino: "Fluorescence Energy Transfer to Tailed Acridine Oranges from Pyrene Excimer" Chem.Lett.1996. 135-136 (1996)
Y.Tanaka、H.Akisada、T.Fujimoto、N.Nishino:“从芘准分子到尾吖啶橙的荧光能量转移”Chem.Lett.1996。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
K.Tomizaki: "Catalytic activities of an artificial protein with designed loops" Peptides,the Proceedings of the First International Peptide Symposium. 1・1(in press). (1998)
K. Tomizaki:“具有设计环的人工蛋白质的催化活性”,第一届国际肽研讨会论文集 1·1(出版中)。
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- 影响因子:0
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- 通讯作者:
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