人工タンパク質の新規設計による細胞および抗体ターゲッティング機能分子の創製

通过人工蛋白质的新颖设计创建靶向功能分子的细胞和抗体

• 批准号: 12019259
• 负责人: 西野 憲和
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kyushu Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12019259/
• 关键词: ターゲッティング素子; 人工タンパク質; βαβα構造体; ペルオキシダーゼモデル; アニリンヒドロキシラーゼ活性

ポリペプチドの4α-ヘリックスバンドル構造体またはβαβα-構造体の限定された位置に、細胞接着性機能(RGD配列)や抗体認識機能(糖鎖)等々を導入したターゲティング機能分子の構築を提案した。さらにポルフィリン等の機能団を導入することにより物質情報変換機能を有する独創的な人工タンパク質分子の構築への展開を試みた。前年度、人工的に設計し組み立てたβαβα-構造体(49-ペプチド)に酵素らしさを持たせることを目標に、ペルオキシダーゼをモデルとし、ポリペプチドが形成する内部疎水場を反応場とするFe(III)ポルフィリン環導入βαβα-構造体(基本モデル)の構築に成功しているので、今年度はFe(III)ポルフィリンに配位するHisの位置を変えた(His scanning)4種の49-ペプチドを設計合成した。4種のβαβα型49-ペプチドはいずれもcumene hydroperoxideおよび過酸化水素を用いた(N-methyl-carbamoyl)-3,7-bis(dimetylamino)-10H-phenothiazine酸化活性に相違があり、Fe(III)ポルフィリンへのHisの配位状態と対応していた。特に、Hisの位置を基本モデルの位置から約一巻き分だけ上あるいは下に移動させたものが高活性であり、反応場の微細環境調整に成功した。また、ポルフィリン鉄錯体を坦時したβαβα-構造体を機能的に進化させるため、ポルフィリン環近傍にフラビンの導入を行った。1-benzyl-1,4-dihydronicotinamideを用いてアニリンヒドロキシラーゼ類似活性を測定した。活性はpHおよび有機溶媒含率に対して依存性を示したことから、βαβα-構造体の形成が活性発現に寄与していることがわかった。

This paper reports on the introduction of four alpha-molecular markers, such as cell adhesion mechanism (RGD), antibody recognition machine (glucose), and so on, into the proposal for the establishment of molecular biology. It is possible to have a unique human resource, such as the number of people who can buy goods, goods, and information reports. In the previous year, the artificial equipment design system established the β α β-α-structure system (49-α α-α). The enzyme enzyme was used to form an internal water field anti-market Fe (III). The environment was successfully introduced into the β α α-α-structure (basic environment). This year's Fe (III) equipment equipment coordination equipment His location equipment equipment (His scanning) 4 equipment 49-device design synthesis device. The acidified water was treated with N-methyl-carbamoyl (N-methyl-carbamoyl)-3, dimetylamino bis (dimetylamino)-10H-phenothiazine acidizing activity and Fe (III) acidizing activity. The location of the special and His stations is very basic. The location of the station is about one minute. The equipment is highly active and the anti-site microenvironment is successfully rectified. On the other hand, the improvement of the mechanism of the system is very important for the improvement of the mechanical energy of the system. 1 benzylMush1 4Mutual dimethyl ronicotinamide resin is used to determine the activity of the product. The organic solvent content of active pH and the dependence of organic solvent content on the formation of β α β α-structure and β α α-structure showed that the active compound was sent to the substrate.

项目成果

K.Tomizaki: "Chiral assembly of a pair of free base porphyrins and peroxidase-like activity of iron (III) porphyrins in four-α-helix bundle structures with dimerized two-α-helix polypeptides"J.Chem.Soc.,Perkin Trans.2. 2000. 1067-1074 (2000)

K. Tomizaki：“一对游离碱卟啉的手性组装和铁 (III) 卟啉的过氧化物酶样活性在四 α-螺旋束结构中与二聚化的双 α-螺旋多肽”J.Chem.Soc.，Perkin 2000. 1067-1074 (2000)

K.Tomizaki: "Design and characterization of flavoenzyme models in the course of chemical evolution of four-α-helix hundle polypeptides"J.Chem.Soc.,Perkin Trans.2. 2000. 813-822 (2000)

K. Tomizaki：“四α螺旋多肽化学进化过程中黄素酶模型的设计和表征”J.Chem.Soc.，Perkin Trans.2000。813-822（2000）

K.Tomizaki: "De novo design of hemoprotein model with peroxidase activity toward lipophilic peroxide"Chemistry Letters. 2000. 648-649 (2000)

K.Tomizaki：“对亲脂性过氧化物具有过氧化物酶活性的血红素蛋白模型的从头设计”化学快报。