权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

一酸化窒素による蛋白質リン酸化酵素活性の制御機構に関する研究

一氧化氮调控蛋白激酶活性的机制研究

基本信息

批准号：
08877026
负责人：
吉川潮
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Kobe University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

一酸化窒素はグアニル酸シクラーゼを標的とし細胞内サイクリックGMP濃度を上昇させ、サイクリックGMP依存性プロテインキナーゼによる蛋白質リン酸化反応を介してその作用を発揮していることが通説となっている。しかし、各組織におけるcGMP依存性プロテインキナーゼの分布、発現量では一酸化窒素の広範な作用を説明できず、一方、一酸化窒素による蛋白質修飾反応が生じることも知られている。そこで、本研究では一酸化窒素がサイクリックGMP依存性プロテインキナーゼ以外の蛋白質リン酸化酵素に直接作用することを仮定し、プロテインキナーゼCファミリーをモデルとして一酸化窒素をはじめとするストレスシグナルによる各種の蛋白質リン酸化酵素の活性制御の検討を行った。試験管内で一酸化窒素を作用させた結果、プロテインキナーゼCファミリーのうちδ分子種の脂肪性活性化因子(ジアシルグリセロールおよびリン脂質)非存在下の酵素活性が上昇することが示された。そこで、プロテインキナーゼCδ分子種を培養細胞に高発現させ、細胞を一酸化窒素処理後、δ分子種を免疫沈降しその活性を測定したところ、試験管内ほどの顕著な効果はみられず、ごくわずかな活性上昇が観察された。一方、プロテインキナーゼCと高い相同性を示す蛋白質リン酸化酵素であるRACプロテインキナーゼは、熱ショック等のストレス処理により顕著な活性上昇が観察されたが、一酸化窒素処理によっては、やはり、顕著な活性化は観察されなかった。これらの結果から、特定の蛋白質リン酸化酵素は、少なくとも試験管内では一酸化窒素により活性制御を受け、また、RACプロテインキナーゼが各種のストレスにより活性化を受けることが明らかになり、各種の細胞ストレスによる蛋白質リン酸化酵素活性の制御機構についてその分子機構解明の端緒となる結果を得ることができた。

A protein that regulates the acidification of proteins increases the concentration of GMP in cells dependent on GMP. The distribution and production of cGMP dependent proteins in various tissues are explained by the role of cGMP in protein modification. In this study, we investigated the activity control of protein acidifying enzymes other than GMP-dependent protein acidifying enzymes. As a result of the action of an acidifying hormone in the test tube, the activity of the enzyme increased in the absence of a fatty activation factor (lipid). The activity of δ molecular species in cultured cells was measured after treatment with an acidified hormone. On the one hand, the protein linacidifying enzyme with high identity shows that the activity of RAC proteininkannana The results show that specific protein acidifying enzymes are regulated by the activity of an acidifying enzyme in the test tube, and the activity of a specific protein acidifying enzyme is regulated by the activity of a specific acidifying enzyme in the test tube.