ミネラルコルチコイドおよびグルココルチコイド産生細胞の最終分化機構

盐皮质激素和糖皮质激素产生细胞的终末分化机制

• 批准号: 08680701
• 负责人: 向井 邦晃
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08680701/
• 关键词: 副腎皮質; ステロイドホルモン; ミネラルコルチコイド; グリコルチコイド; 細胞分化

高等動物の副腎皮質は、未分化な副腎原基細胞から発生・分化し、外側から球状層、束状層、網状層と呼ばれる3種類の細胞層から構成される組織となる。この3層の機能的に異なり、球状層がミネラルコルチコイドを、束・網状層がグルココルチコイドを特異的に分泌する。本研究の目的は、細胞工学的、および、発生工学的方法を用いて、副腎皮質を構成する細胞の、層構築を含めた最終分化に関与する因子とその機能を明らかにすることである。細胞層特異的に外来遺伝子を発現させるには、特異的なプロモーター(ターゲティングプロモーター)が必要である。まず、グルココルチコイド産生細胞層選択的に外来遺伝子を発現させるためのターゲティングプロモーターの同定を行った。グルココルチコイド産生細胞である束・網状層細胞に最も特徴的に発現する遺伝子は、CYP11B1である。本研究の代表者らはすでにこの遺伝子の調節領域を含むクローンを得ている。これと、束・網状層細胞と性質の似たY-1細胞に加え、種々の組織由来の株細胞を用いてトランスフェクトし、ターゲティングプロモーターの同定を行った。その結果、CYP11B1の上流1.2kbのDNAが、副腎皮質の束・網状層に特異的なプロモーターとして機能することが強く示唆された。ミネラルコルチコイド産生細胞のためのターゲティングプロモーターを同定するにあたっては、球状層の細胞の性質を保持した細胞株はこれまで知られていない。そのため、ラット副腎から球状層細胞の調製を行った。副腎皮質の皮膜に接した部分から細胞を分散させ、ショ糖密度勾配遠心法により、細胞を分画した。これらからRNAを抽出し、逆転写酵素反応後PCR法を用いて、CYP11B2を発現している細胞を同定し、単離することに成功した。この細胞を用いて、球状層に特徴的な遺伝子であるCYP11B2遺伝子上流からターゲティングプロモーター領域の同定をすることが可能になり、その実験を継続している。

The cells of paraneodermis, undifferentiated primordial cells, globular cells, fasciculate cells and reticular cells of higher animals are divided into tissue cells. On the other hand, there is a lot of information about the secretion of the machine, the ball, the network, and the network. In this study, the purpose of this study is to use the methods of cellular engineering, engineering, hygiene and engineering, and to use the methods of cell engineering, paraneodermis and paraneodermis to differentiate into cancer cells, which contains the most important differentiation and factors. The exotic child of the cell, the child of the cell, and the child of the cell. The foreign child selected for the health care unit may have the same order as the other child. This is the most important part of the network network cell that has the most special information, such as the CYP11B1 data. In this study, the representative, the representative and the representative in this study. The number of cells is similar to that of Y-1 cells, and the tissue origin of the cells is similar to that of Y-1 cells, and the tissue origin of the cells is similar to that of Y-1 cells. The result of the test, the CYP11B1 upstream 1.2kb DNA, and the network network of the sub-network network. The computer can strongly indicate the failure. In the first place, the cells were born, the cells were born and the cells were born. The cell is in the shape of a ball, and the cell is in the shape of a ball. The skin membrane of the accessory skin is connected to the part of the cell, the sugar density is matched with the heart method, and the cell is drawn separately. After the enzyme was extracted and reversed by RNA, the PCR method was used and CYP11B2 was used to show that the cells were identical and isolated. The location of the cell is the same as that in the field of the cell, which is the same as that in the field of the cell, which is the same as that in the field of the cell, which is the same as that in the field of the CYP11B2, which is the same as that in the field of communication.

项目成果

向井邦晃: "副腎皮質刺激ホルモン(ACTH)に対するグルココルチコイド合成酵素遺伝子(CYP11B1)の応答と転写因子AP-1の役割" 生化学. 68・7. 655-655 (1996)

Kuniaki Mukai：“糖皮质激素合酶基因（CYP11B1）对促肾上腺皮质激素（ACTH）的反应和转录因子AP-1的作用”生物化学68・7（1996）。

Kuniaki Mukai: "Zone-specific expression of the rat CYP11B1 gene in the adrenal cortex" 2nd International Synposium on Molecular Steroidogenesis. 18-18 (1996)

Kuniaki Mukai：“肾上腺皮质中大鼠 CYP11B1 基因的区域特异性表达”第二届国际分子类固醇生成研讨会。

Kuniaki Mukai: "Zone-specific transcriptional activation of the CYP11B1 gene by an AP-1 transcription factor in the rat adrenal cortex" The Fourth Asian Conference on Transcription. 74-74 (1996)

Kuniaki Mukai：“大鼠肾上腺皮质中 AP-1 转录因子对 CYP11B1 基因的区域特异性转录激活”第四届亚洲转录会议。

Kuniaki Mukai: "Cell-specific and hormonally regulated gene expression directed by the CYP11B1 gene promoter in the rat adrenal cortex" The Keio Journal of Medicine. 45・Suppl. S61-S61 (1996)

Kuniaki Mukai：“大鼠肾上腺皮质中 CYP11B1 基因启动子指导的细胞特异性和激素调节基因表达”Keio Journal of Medicine 45·S61-S61 (1996)。