エピジェネティックなDNA損傷履歴蓄積と老化

表观遗传DNA损伤历史积累和老化

• 批准号: 22K11799
• 负责人: 太田 翔
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K11799/
• 关键词: 老化; エピゲノム; ヒストン; DNA損傷

本研究で新たに設計した融合分子であるdCas9-scFokIをドキシサイクリン依存的に発現誘導することのできるレンチウイルスプラスミドコンストラクトを作製した。このプラスミドを使ってレンチウイルスを生産し、ヒト培養細胞であるRPE-1 hTERTに感染させることで細胞株を樹立した。dCas-scFokIをドキシサイクリン依存的に誘導可能なマウス個体作製に向けてES細胞の樹立を実施した。マウスゲノムのROSA遺伝子座からrtTA遺伝子が恒常的に活性化するように設計したノックイン用のプラスミド、ならびにCol1a1遺伝子座の下流からtetOプロモーターによって制御されるdCas9-scFokI遺伝子を組み込んだプラスミドを作製し、ES細胞の遺伝子改変を実施した。

The new fusion molecule designed in this study was Cas9-scFokI をドキシサイクリンンに発appears to induce することのできるレンチウイルスプラスミドコンストラクトをした.このプラスミドを Make the ってレンチウイルスを produce し, ヒト cultured cells であるRPE-1 hTERT has been used to infect and establish cell lines. dCas-scFokI can be used to induce individual production of ES cells depending on the type of induction.マウスゲノムのROSA 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　ifies 　　　　　ようにDesigned by したノックインのプラスミド, ならびにCol1a1 伝子台のObscene からtetOプロモーターによってcontrolされるdCas9-scFokI The remaining parts of the group are made by ES cells, and the ES cells are changed by the original version.