Ｂ型肝炎の病態解明を目指した新規モデルマウスの作成と免疫／腫瘍学的解析

创建新的小鼠模型和免疫/肿瘤学分析，旨在阐明乙型肝炎的病理学

基本信息

批准号：
13J02056
负责人：
犬塚義
金额：
$ 1.92万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2013
资助国家：
日本
起止时间：
2013-04-01 至 2016-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

ALB-CreERT2-HBsAg cTgマウスにタモキシフェン刺激をすることにより、HBsAg発現誘導が起こることは確認できたが、その後のALT上昇や組織学的な肝炎像を確認することはできなかった。一方で、マイクロアレイRNA発現解析にてⅢ型IFNであるIfnlr1発現の亢進が16倍以上に亢進していることが確認され、HBs発現に対して免疫応答が起こっていることがわかった（自然免疫モデル）。申請者は再活性化したHBVの臨床検体を用いたゲノム解析において、再活性化したウイルスのheterogeneityが非常に乏しい（ほぼ単一なウイルスで占められている）ことや、再活性化前のHBsAg陰性HBcAb陽性の状態で肝臓内に潜むウイルスも同様にheterogeneityが非常に乏しく、再活性化前のウイルスのheterogeneityが再活性化後のウイルスのheterogeneityを反映しているという新たな知見を得て論文発表を行っている。そこで、HBV再活性化モデルとしてのALB-CreERT2-HBsAg cTgマウスの使用を計画し、HBsワクチンを事前にマウスに投与することにより、HBs抗原に対する免疫を獲得し、それらのマウスに任意の時期にタモキシフェン誘導にてHBs抗原を発現させることで起こる免疫応答につき評価した。タモキシフェン投与後、HBsAg mRNAの発現上昇が起こり、組織学的にもマクロファージやリンパ球の浸潤が確認され、免疫応答が惹起されていることがわかった。マイクロアレイRNA発現解析にて、CXCL13をはじめとするTh1,Th2,B細胞を誘導する様々なケモカインの上昇を認めた（獲得免疫モデル）。これらのように、事前にワクチンを投与・非投与で別の環境を作ることにより、自然免疫応答・獲得免疫応答のそれぞれの環境を作り分けることに成功した。

尽管可以证实，他莫昔芬在Alb-Creert2-HBSAG CTG小鼠中的刺激导致HBSAG表达诱导，但未证实随后的ALT升高和组织学肝炎图像。另一方面，微阵列RNA表达分析证实，IFNR1表达（III型IFN）增加了16次或更多，并且针对HBS表达（先天免疫模型）发生了免疫反应。申请人发表了他的论文，并提出了新的发现，即在基因组分析中使用重新激活的HBV的临床标本分析，申请人发现，已重新激活病毒的异质性非常差（几乎由单个病毒占据），并且在HBSAG阴性较差的情况下，肝脏在肝脏中隐藏的病毒也非常贫穷，并且在反应率之前也非常贫穷，并且在HBSAG上的反应性也很差。重新激活后病毒的异质性。因此，我们计划使用Alb-Creert2-HBSAG CTG小鼠作为重新激活HBV的模型，并评估了当小鼠对HBS抗原免疫时发生的免疫反应，并通过对HBS疫苗进行对HBS抗原进行免疫反应，并通过对任何给定时间的HBS抗原对小鼠进行HBS疫苗，并由Tamoxifen的任何给定时间表达HBS抗原。他莫昔芬给药后，HBSAG mRNA表达增加，并且在组织学上证实了巨噬细胞和淋巴细胞的浸润，表明诱导了免疫反应。微阵列RNA表达分析表明，诱导Th1，Th2和B细胞的各种趋化因子（包括CXCL13）（可获得的免疫模型）的增加。如上所述，通过通过预先管理或未提前管理的疫苗来创建不同的环境，我们成功地为先天和获得的免疫反应创造了不同的环境。