ｍｉＲＮＡサイレンシング複合体による新規ｍＲＮＡ分解機構の解析

miRNA 沉默复合物对新型 mRNA 降解机制的分析

• 批准号: 13J02601
• 负责人: 牧野 支保
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13J02601/
• 关键词: mRNA分解; 翻訳抑制; mRNA/タンパク質品質管理機構; 遺伝子発現制御; miRNA; ポリ(A)鎖; デキャッピング

1. miRNA発現制御機構におけるポリ(A)鎖短鎖化複合体の機能解析miRNAサイレンシング複合体の構成因子で、発現抑制の中心として機能するTNRC6とポリ(A)鎖短鎖化複合体による標的mRNA本体の分解と翻訳抑制の分子機構を明らかにすることを目的とした。遺伝学的な解析が容易な出芽酵母において、miRNAによる発現抑制機構の系の構築に成功した。この系を用いた解析により、TNRC6はポリ(A)鎖短鎖化複合体を介してポリ(A)鎖の短鎖化によらずmRNA本体の分解を促進し、さらに翻訳の開始段階を阻害していた。これら二つの機構には、デキャッピング促進因子が必須であることを見出した。本年度はデキャッピング促進因子のポリ(A)鎖短鎖化複合体との相互作用や、ATPase活性を欠失させた変異体を作製し、これらの変異体がTNRC6-ポリ(A)鎖短鎖化複合体による発現抑制に与える影響を検証した。また、TNRC6-ポリ(A)鎖短鎖化複合体による発現抑制に関与する新規因子を同定するため、遺伝学的スクリーニング系の条件検討を行った。2. 品質管理機構におけるリボソーム結合因子Asc1の機能解析出現頻度の低いレアコドンをコードする配列は、リボソームの停滞を引き起こして翻訳を阻害（翻訳アレスト）する。この翻訳アレストに必須な因子Asc1を同定し機能解析を進めてきた。本年度、Asc1欠損株で検出される翻訳アレスト配列由来の異常翻訳産物の解析を行った。その結果、Asc1欠損株では、レアコドンの数に比例して+1RFSの頻度が上昇したが、最適コドンの連続配列では+1RFSは観察されなかった。また、Asc1欠損株での+1RFSを促進する因子として、リボソームに結合する因子を同定した。レアコドンがP-siteに位置した場合に生じる+1RFSを、Asc1が抑制して正常な読み枠を維持する分子機構が明らかとなった。

1. The miRNA control system (A) makes it possible to analyze the synthesis of the complex in the miRNA system, and to realize that the suppression center is capable of reducing the mRNA ontology of the complex (A). The molecular mechanism is clear that the molecular mechanism is responsible for the purpose of the molecular mechanism. It is easy to sprout yeast yeast and miRNA assay to show that the inhibition mechanism is successful. The system is used to analyze the data, TNRC6 the complex (A) to shorten the complex (A) to improve the decomposition of the mRNA ontology, and to flip the opening section of the device to prevent the damage. It is necessary to ensure that the promotion factors must be properly registered by the two-party organization. This year, the promotion factor (A) shortens the complex. Interaction, ATPase activity loss, TNRC6- activity, and shortening of the complex. This is the same as that of the new regulation factor, and the condition of the condition is the same as that of the new regulation factor. The condition is the same as that of the new regulation factor. two。 The quality management agency is responsible for the analysis of the combination factor Asc1, which can be used to analyze the low-temperature distribution, the stagnation and the failure of the system. If you want to change the required factor Asc1, you will be able to parse the data in the same machine. This year, Asc1 owes a lot of information about the origin of the arrangement, the analysis of the products and the analysis of the data. The result of the test, the proportion of the number of strains that are not available in Asc1 + the number of strains in 1RFS, and the most expensive link in the column + 1RFS to check the number of strains. The positive rate of anti-tumor and Asc1-deficient strain plus 1RFS promoter was determined by the combination of anti-tumor factor and anti-tumor factor. The location of the P-site is related to the production of the 1RFS, and the Asc1 suppresses the normal operation and maintenance of the molecular mechanism.

项目成果

TNRC6依存的なサイレンシングにおけるCCR4-NOT複合体の保存された機能の解析

TNRC6依赖性沉默中CCR4-NOT复合物的保守功能分析

• 发表时间: 2013
• 作者: Gen Chiaki;Raffaella Schneider;Takaya Nozawa;Kazuyuki Omukai;Marco Limongi;Naoki;Yoshida;Alessandro Chieffi;牧野 支保
• 通讯作者: 牧野 支保

TNRC6依存的サイレンシングにおけるCCR4-NOT複合体の保存された機能の解析

TNRC6依赖性沉默中CCR4-NOT复合物的保守功能分析

• 发表时间: 2013
• 作者: Gen Chiaki;Raffaella Schneider;Takaya Nozawa;Kazuyuki Omukai;Marco Limongi;Naoki;Yoshida;Alessandro Chieffi;牧野 支保;牧野 支保
• 通讯作者: 牧野 支保

酵母を用いたTNRC6/GW182依存のサイレンシングにおけるCcr4-Not複合体の機能

Ccr4-Not 复合物在酵母 TNRC6/GW182 依赖性沉默中的功能

• 发表时间: 2015
• 作者: 伊津野彩子;北山兼弘;小野田雄介;辻井悠希;内山憲太郎;永野惇;本庄三恵;工藤洋;井鷺裕司;牧野 支保
• 通讯作者: 牧野 支保

miRNA依存サイレンシング因子TNRC6によるmRNA分解と翻訳抑制機構の解析

miRNA依赖性沉默因子TNRC6对mRNA降解和翻译抑制机制分析

• 发表时间: 2013
• 作者: Gen Chiaki;Raffaella Schneider;Takaya Nozawa;Kazuyuki Omukai;Marco Limongi;Naoki;Yoshida;Alessandro Chieffi;牧野 支保;牧野 支保;牧野 支保;牧野 支保;牧野 支保;牧野 支保;牧野 支保
• 通讯作者: 牧野 支保

東北大学薬学研究科遺伝子制御薬学分野

东北大学药学研究生院基因调控药学系