ROLE OF SURFACE MOLECULES IN COLONIZATION AND BIOLOGICAL MIMICRY

表面分子在定植和生物拟态中的作用

基本信息

项目摘要

Synthesis of lectin-like protein adhesive molecules is a favored method by which oral bacteria adhere to hard and soft oral surfaces or other bacteria already adhering to these surfaces. The evolutionary origin of adhesin molecules is unknown. Prevotella loescheii, a Gram negative bacteroide-like inhabitant of the oral cavity synthesizes a 75 kDa protein adhesin that recognizes galactosyl moieties. The adhesin has been isolated and characterized biochemically and the gene encoding the protein has been cloned and sequenced. Its gene is one of only two known examples in which a stretch of DNA sequence is not read at the level of transcription; this is the hallmark of a rare ribosomal "frameshifting hop". A 213 residue sequence extending from amino acid 318 to 531 shows significant homology to the Escherichia coli enzyme, beta- galactosidase. Recent studies have shown that P. loescheii synthesizes its own inducible beta-galactosidase when grown at the expense of lactose. This observation raises the possibility that part of the adhesin, including its binding domain, was derived from the enzyme. If this supposition is correct, then the degree of amino acid homology between the adhesin and the P. loescheii b- galactosidase should be greater than that of the enteric enzyme. The bacteroide beta-galactosidase is currently being purified by conventional chromatographic techniques for the purpose of characterizing its properties and determining terminal amino acid sequence. This information will be used to clone and sequence the gene so that the amino acid sequence can be deduced for comparison with the adhesin. The gene of P. loescheii enzyme; enolase, has been cloned and sequenced because a fraction of the total amount synthesized was found on the surface of the cell. The enzyme is currently being purified and characterized to determine if two different isoforms of the protein exist.
合成类凝集素蛋白粘附分子是一个备受青睐的研究方向 口腔细菌粘附于硬和软口腔表面的方法 或者已经附着在这些表面上的其他细菌。 的 粘附素分子的进化起源是未知的。 Prevotella Loescheii,一种革兰氏阴性拟杆菌样的口腔寄生菌, 空腔合成一种75 kDa的蛋白质粘附素, 半乳糖基部分。 粘附素已被分离并表征 已经克隆了编码该蛋白质的基因, 测序 它的基因是仅有的两个已知的例子之一, DNA序列的延伸在转录水平上不被读取; 这是罕见的核糖体"移码跳跃"的标志。 a 213 从氨基酸318延伸至531的残基序列显示 与大肠杆菌酶显著同源,β- 半乳糖苷酶。 最近的研究表明,P.loescheii 当生长在 lactose的费用 这一观察提出了一种可能性, 部分粘附素,包括其结合结构域,来自 酶 如果这个假设是正确的,那么氨基的程度 粘附素与洛氏疟原虫B- 半乳糖苷酶的活性应大于肠酶的活性。 的 类杆菌β-半乳糖苷酶目前正通过 常规色谱技术,用于 表征其性质并测定末端氨基酸 顺序 这些信息将用于克隆和测序 基因,以便可以推导出氨基酸序列用于比较 与adhesin。 罗氏青霉酶的基因;烯醇化酶,已经被 克隆和测序,因为总量的一小部分, 在细胞表面发现了合成的。 所述酶是 目前正在进行纯化和鉴定,以确定是否有两个 该蛋白存在不同的同种型。

项目成果

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