GENETICS OF FLAVIN DEHYDROGENASE-MEMBRANE INTERACTIONS
黄素脱氢酶-膜相互作用的遗传学
基本信息
- 批准号:3286186
- 负责人:
- 金额:$ 8.27万
- 依托单位:
- 依托单位国家:美国
- 项目类别:
- 财政年份:1985
- 资助国家:美国
- 起止时间:1985-04-01 至 1988-03-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
The objective of this study is to determine how flavin dehydrogenases
interact with the membrane-bound electron transport chain in Salmonella
typhimurium. This work will focus on two main topics:
1. Regulation of the put operon. The put operon has a unique control
mechanism that seems to be mediated by the putA gene product, proline
oxidase. When exogenous proline is available, proline oxidase binds to the
membrane where it functions as flavin dehydrogenase; but in the absence of
proline, it accumulates in the cytoplasm where it acts as an autogenous
repressor. Determining how proline oxidase controls its own expression may
help us understand how other membrane-bound regulatory proteins work. In
addition, the regulatory properties of putA mutations provide a genetic
selection for membrane interaction mutants.
2. Flavin dehydrogenase-membrane interactions. Flavin dehydrogenases must
associate with specific membrane sites in order to interact properly with
the electron transport chain. However, it is not known what component(s)
of the electron transport chain they interact with directly or even how
they interact with the membrane. Genetic studies on the interaction of
flavin dehydrogenases with the electron transport chain will provide a
novel approach for understanding how proteins interact with membranes in
vivo. All of the components involved and the specific interactions
required can be defined by isolating and characterizing two unique classes
of dehydrogenase mutations: mutations that prevent the dehydrogenase from
interacting with the membrane but don't eliminate enzymatic activity of the
dehydrogenase in vitro, and mutations that alter with dehydrogenase so that
it can still bind the membrane but can't properly interact with the
electron transport chain. Genetic and biochemical analysis of these
mutants will indicate what membrane component(s) directly interact with
flavin dehydrogenases and what kinds of interactions are required between
flavin dehydrogenases and the membrane electron transport chain. Such
mutants should provide insight into the general biological problem of how
peripheral membrane proteins interact with the membrane.
本研究的目的是确定黄素分解酶
与沙门氏菌中的膜结合电子传递链相互作用
鼠伤寒。 这项工作将侧重于两个主要专题:
1. put操纵子的调控。 put操纵子具有独特的控制能力
这一机制似乎是由putA基因产物脯氨酸介导的
氧化酶。 当外源脯氨酸可用时,脯氨酸氧化酶结合到
膜在那里它的功能作为黄素脱氢酶;但在缺乏
脯氨酸,它积累在细胞质中,在那里它作为一个自体
抑制子。 确定脯氨酸氧化酶如何控制其自身的表达,
帮助我们了解其他膜结合调节蛋白的工作原理。 在
此外,putA突变的调节特性提供了一种遗传学机制,
选择膜相互作用突变体。
2.黄素氧化酶-膜相互作用。 黄素氧化酶必须
与特定的膜位点结合,以便与
电子传递链。 但是,不知道是什么组件
它们与电子传递链的直接相互作用,
它们与细胞膜相互作用。 遗传学研究的相互作用
具有电子传递链的黄素氧化酶将提供一种
了解蛋白质如何与细胞膜相互作用的新方法
vivo. 所有涉及的组件和特定的相互作用
可以通过隔离和表征两个独特的类来定义所需的
脱氢酶突变:阻止脱氢酶
与膜相互作用,但不消除酶的活性,
脱氢酶在体外,和突变,改变与脱氢酶,
它仍然可以结合膜,但不能正确地与膜相互作用,
电子传递链 这些基因和生化分析
突变体将指示哪些膜组分直接与
以及它们之间需要何种相互作用
黄素化酶和膜电子传递链。 等
突变体应该提供洞察一般的生物学问题,
外周膜蛋白与膜相互作用。
项目成果
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