家蚕核型多角体病毒对两株特殊家蚕细胞系侵染差异的机制研究

家蚕核型多角体病是蚕业的主要病害，占整个蚕病损失的70％左右，目前没有任何有效的药物控制方法，因此急需获得控制BmNPV病毒侵染的关键基因，为该病毒的转基因抗性育种提供靶标基因。项目以两种来源相同，但对BmNPV病毒侵染存在差异的两株特殊家蚕卵巢细胞系BmN-SWU1（易感细胞）和BmN-SWU2（不易感细胞）为研究材料，构建了携带EGFP荧光标记的重组病毒vA4-VP39-EGFP，利用免疫荧光技术和基因芯片技术分析了BmNPV病毒对两株特殊家蚕细胞系侵染差异的机制。研究结果表明： BmNPV病毒能够大量进入易感细胞，而只有少量病毒能进入不易感细胞。⑵BmNPV进入BmN-SWU2细胞后，病毒的晚期和极晚期基因表达会受到抑制，而早期基因表达不受影响，且不易感细胞在病毒感染早期就检测到宿主细胞蛋白合成关闭。⑶虽然两株细胞都来自同一组织，但与细胞组成、免疫进程、刺激反应和翻译调节等相关基因的表达存在较大差异。同时， Q RT-PCR结果证实与免疫相关的蛋白在不易感细胞中高量表达。（4）获得BmN-SWU2细胞中与BmNPV病毒抗性相关的候选基因3个。上述结果证实了BmNPV病毒对两株特殊家蚕细胞系的差异侵染受到宿主细胞多因素控制，其中病毒粒子侵入和基因组复制是造成BmNPV对BmN-SWU2细胞不易染的主要原因。