Bacterial 2,4-dioxygenases: Catalytic mechanism of 2,4-dioxygenolytic ring cleavage

死亡细菌酶1h -3-羟基-4-氧化胆碱-2,4-双加氧酶（Qdo）和1h -3-羟基-4-氧化胆碱-2,4-双加氧酶（Hod）和死亡真核生物黄酮醇-2,4-双加氧酶（F24D）的催化作用。o -异合子克隆与kohlenmonoid的关系。原核素F24D是一种较弱的细胞。在金属中心和有机工厂的氢化焊机。Die von den Strukturgenen qdo and hod abgeleiteten Aminosäuresequenzen zeigen keinerlei Homologie zu bekannten Oxygenasen, sonbeitzen zwar geringe, aber signante Ähnlichkeit zu enzyme des α / β - hydroase - faltungstyps。Eigene Arbeiten deuten darauf欣,daßQdo katalytisch relevante Ser -和His-Reste besitzt,死穴Ser -和His-Resten der katalytischen Triade der Serin-Hydrolasen entsprechen,所以daßQdo不努尔strukturell, sondern欧什funktionell麻省理工学院Proteinen desα/ beta-Hydrolase-Faltungstyps verwandt祖茂堂盛scheint。(i)底物结合与催化相关的Die f<s:1> r底物结合与催化相关Aminosäurereste der Qdo and Hod sollen identifiziert werden (gerichtete Mutagenese; chemische derivatives; substrate -trapping)；（ii）在此情况下，卖方应予以赔偿，卖方应予以赔偿。Qdo zu kristallisieren (f<e:1> r Röntgenstrukturanalysen)；（iii）原核蛋白F24D与Qdo和hdhbzw的遗传关系。真核组织schen F24Ds verglichen werdenDas Ziel ist die Aufklärung des catalysmechanismus der enzymatic schen 2,4- dioxygenolyse。在合作中的结晶研究[j] . Dijkstra教授。

Die bakteriellen Enzyme 1H-3-Hydroxy-4-oxochinolin-2,4-Dioxygenase (Qdo) und 1H-3-Hydroxy-4-oxochinaldin-2,4-Dioxygenase (Hod) und die eukaryontische Flavonol-2,4-Dioxygenase (F24D) katalysieren die Spaltung von N- bzw. O-Heterozyklen unter Freisetzung von Kohlenmonoxid. Eine prokaryontische F24D ist bisher nicht beschrieben. Qdo und Hod enthalten weder ein Metallzentrum noch einen organischen Cofaktor. Die von den Strukturgenen qdo und hod abgeleiteten Aminosäuresequenzen zeigen keinerlei Homologie zu bekannten Oxygenasen, sondern besitzen zwar geringe, aber signifikante Ähnlichkeit zu Enzymen des alpha/beta-Hydrolase-Faltungstyps. Eigene Arbeiten deuten darauf hin, daß Qdo katalytisch relevante Ser- und His-Reste besitzt, die den Ser- und His-Resten der katalytischen Triade der Serin-Hydrolasen entsprechen, so daß Qdo nicht nur strukturell, sondern auch funktionell mit Proteinen des alpha/beta-Hydrolase-Faltungstyps verwandt zu sein scheint.(i) Die für Substratbindung und Katalyse relevanten Aminosäurereste der Qdo und Hod sollen identifiziert werden (gerichtete Mutagenese; chemische Derivatisierungen; Substrat-trapping); (ii) es soll versucht werden, Hod und evtl. Qdo zu kristallisieren (für Röntgenstrukturanalysen); (iii) eine prokaryontische F24D soll gereinigt und mit Qdo und Hod bzw. eukaryontischen F24Ds verglichen werden. Das Ziel ist die Aufklärung des Katalysemechanismus der enzymatischen 2,4-Dioxygenolyse.Versuche zur Kristallisation von Qdo und Hod erfolgen in Kooperation mit Prof. B. Dijkstra, Groningen.