Selective labeling of glycoconjugates with modified nucleotide sugars as donor substrates of recombinant glycosyltransferases

Glykokonjugten(寡糖，甘氨酸，甘油脂)半乳糖-N-乙酰半乳糖胺衍生物，底物von rekombinanten GlykosylTransferasen(Galts)BZW.多肽N-乙酰半乳糖基转移酶(ppGalNAc-ts)。我是Mittelpenkt des Vorhabens stehen ehen eine direkte and inrerekte Markierungsstrategie，die unterschiedliche Ansprüche an die Akzeptanz der Gal-ts and ppGalNAc-ts für die syntisisierten Nukletidzuckerate stellen。在市场上，每个人都会被转移到市场上，而不是在市场上。在C-6-羟基葡萄糖和Zuckers的酶促氧化中，可吸入化学酶合成von修饰剂(M)UDP-α-D-半乳糖和UDP-N-乙酰-α-D-半乳糖胺(生物素、荧光素、异源异源双链酶)。用Von HPLC Analysen的形式标记Glykokonjugate Sollen，Western blots and Mikrotiterplattentits untersuht and charakterisiert。

Das Ziel des vorliegenden Antrags ist die selektive Markierung von Glykokonjugaten (Oligosaccharide, Glykoproteine, Glykolipide) mittels nukleotidaktivierter Galactose- bzw.- N-Acetylgalactosaminderivate, die als Donorsubstrate von rekombinanten Glykosyltransferasen aus den beta3/4Galactosyltransferasen (GalTs) bzw. Polypeptid N-Acetylgalactosaminyltransferase (ppGalNAc-Ts) Familien auf spezifische Akzeptorstrukturen übertragen werden können. Im Mittelpunkt des Vorhabens stehen eine direkte und indirekte Markierungsstrategie, die unterschiedliche Ansprüche an die Akzeptanz der Gal-Ts und ppGalNAc-Ts für die synthetisierten Nukleotidzuckerderivate stellen. Bei der indirekten Markierung wird nach dem Transfer eines funktionalisierten Zuckers ein Markierungsreagenz chemoselektiv gekoppelt. Beide Strategien beinhalten chemoenzymatische Synthesen von modifizierter(m) UDP-alpha-D-Galactose und UDP-N-Acetyl-alpha-D-galactosamin, in denen die enzymatische Oxidation der C-6 Hydroxylgruppe des Zuckers durch Galactose Oxidase mit der chemischen Kopplung von Hydrazidreagenzien (Biotin, Fluoreszenzfarbstoffe, homo- und heterobifunktionelle Reagenzien) in situ verknüpft wird. Die markierten Glykokonjugate sollen in Form von HPLCAnalysen, Western Blots und Mikrotiterplattentests untersucht und charakterisiert werden.