Regulation der RNA-Synthese nichtsegmentierter Negativ-Strang-RNA-Viren durch das Matrixprotein am Beispiel des Tollwutvirus

Tollwutvirus的研究表明，RNA合成的非特异性调控机制可使阴性链RNA病毒增强韦尔登。该聚合酶复合物使病毒从酶促激活病毒蛋白（L）和Kofaktor（P）中产生两种不同的激活作用：在韦尔登的转录过程中，亚基因组mRNAs的合成，在转录过程中对病毒RNA-基因组进行整合韦尔登。在来自病毒核蛋白（N）的基因组RNA中，蛋白质复合物（RNP）是一个模板。更重要的是，这种调节因子，即RNA聚合酶的活性，以及RNP的组分，如N-、P-和L-蛋白质，也可以用于病毒前体序列。我们知道，Tollwutvirus Matrixprotein（M）的结构蛋白功能是调节病毒RNA合成的一种功能：转录会抑制M并刺激M。Ziel dieses Vorhabens ist es，den Mechanismus der regulatorischen Interaktion zwischen dem viralen RNA-Syntheseapparat und M aufzuklären.本文主要研究了M-蛋白的氨基内标记、RNA合成调控和功能性M-蛋白的结构功能以及病毒组分间的相互调控。

Am Beispiel des Tollwutvirus soll ein neuartiger Regulationsmechanismus der RNA-Synthese nichtsegmentierter Negativ-Strang-RNA-Viren aufgeklärt werden. Der Polymerasekomplex dieser Viren setzt sich aus dem enzymatisch aktiven Virusprotein (L) und dem Kofaktor (P) zusammen und besitzt zwei unterschiedliche Aktivitäten: im Transkriptionsmodus werden virale, subgenomische mRNAs synthetisiert, während im Replikationsmodus vollständige Kopien des viralen RNA-Genoms hergestellt werden. Template für beide Prozesse ist ein Ribonukleoproteinkomplex (RNP), in dem die genomische RNA vom viralen Nukleoprotein (N) umhüllt ist. Bisher konzentrierte sich die Suche nach regulatorischen Faktoren, die die Aktivität der RNA-Polymerase bestimmen, auf die Komponenten der RNPs, wie die N-, P- und L-Proteine, sowie auf die viralen Promotorsequenzen. Wir konnten kürzlich zeigen, dass das Tollwutvirus Matrixprotein (M) neben der Funktion als Strukturprotein zusätzlich eine regulatorische Funktion bei der viralen RNA-Synthese hat: Transkription wird duch M inhibiert und Replikation stimuliert. Ziel dieses Vorhabens ist es, den Mechanismus der regulatorischen Interaktion zwischen dem viralen RNA-Syntheseapparat und M aufzuklären. Dazu sollen (a) Aminosäuren innerhalb des M-Proteins identifiziert werden, die für die Regulation verantwortlich sind, (b) RNA-Synthese Regulation und Strukturfunktionen des M-Proteins funktionell voneinander getrennt werden und (c) regulatorische Interaktionen zwischen viralen Komponenten oder zellulären Faktoren und M anhand von Mutanten charakterisiert werden.