Untersuchungen zur Rezeptor-Ligand Interaktion mit Hilfe neuer single chain TNF-Derivate

肿瘤坏死因子（TNF）是一种细胞因子，它在生物学上以同源三聚体和两种膜结合物的形式存在，其特征性信号起始于两种受体（TNFR 1和TNFR 2）的三聚体。我们有一种TNF衍生物，在三种TNF单体中有一种单链TNF（single chain TNF; scTNF）。scTNF具有正常野生型TNF的生物活性。丹麦Austausch公司生产TNF衍生物的氨基保护剂，韦尔登，选择性TNFR 1 bzw。TNFR 2，或者说是没有任何的免疫抑制剂。scTNF中的这种突变将是我们的一种尝试，首先是TNF-衍生物，这种突变只是二聚体（不是三聚体），它的突变只是用一种突变分子相互作用，或者是TNFR 1/TNFR 2-混合物的突变。因此，这将是我们最大的利益，这些利益和这些最大的功能heteromerer Rezeptorkomplex zu untersuchen，wie auch definierte Bindungsreaktionen kinetisch zu erfassen。

Tumor-Nekrose-Faktor (TNF) ist ein Zytokin, welches in seiner biologisch aktiven Form als Homotrimer vorliegt und an zwei Membranrezeptoren bindet, wobei die eigentliche Signalinitiierung primär durch eine Trimerisierung der beiden Rezeptoren (TNFR1 und TNFR2) vermittelt wird. Wir haben ein TNF-Derivat konstruiert, bei dem die drei TNF Monomere eines Moleküls über kurze Peptidlinker miteinander verbunden sind (single chain TNF; scTNF). scTNF zeigt die Bioaktivität von normalem löslichem wildtyp TNF. Durch den Austausch bekannter Aminosäurereste von TNF können Derivate hergestellt werden, die selektiv TNFR1 bzw. TNFR2, oder aber keinen der beiden Rezeptoren binden. Das Einbringen dieser Mutationen in scTNF wird es uns erlauben, erstmals TNF-Derivate herzustellen, die einzelne Rezeptoren nur dimerisieren (nicht trimerisieren), die überhaupt nur mit einem einzigen Rezeptormolekül zu interagieren vermögen, oder aber die gezielt heteromere TNFR1/TNFR2-Mischkomplexe erzeugen. So wird es uns möglich sein, das Entstehen und die mögliche Funktion heteromerer Rezeptorkomplexe zu untersuchen, wie auch definierte Bindungsreaktionen kinetisch zu erfassen.