Struktur und Funktion des multifunktionalen Replikationsproteins des Plasmides pRN1 aus dem thermoacidophilen Archaeon Sulfolobus islandicus

Das复制蛋白质粒pRN1清单在多功能蛋白atp酶-，引物酶-和DNA-Polymeraseaktivität。他在iner Peptidkette drei Aktivitäten， die f<s:1>， die replicereforderlich sind上的评论。Von sonderem Interesse ist in Verständnis der ordinierten interinterser Aktivitäten。Die N-terminale Domäne des protein besitzt as活性中心区<e:1> [r] Die dna聚合与突变研究[j]。水晶制造技术：Domäne wurde k<s:1> rzlich von unestimmt。Die kristallisierte Domäne unfast dabei mit 200 Aminosäuren weniger也在verertel des gesamten Proteins中发现了这一现象eingeschränkte DNA-Polymeraseaktivität bzw。DNA-Bindungsaktivitat。insbesonere besitzt die kristallisierte Domäne keine Primaseaktivität mehr。In der C-terminalen Hälfte de protein In the atp -/ Helikase-Domäne。Der Beitrag dieser Domäne f<e:1> r die质粒复制ist völlig unverden。Die Domäne besitzt Sequenzverwandtschaft zum essential Protein D5 der Poxviren。功能性死亡：蛋白质在夜间死亡。在这个项目中，sollen sowohl - as - Volllängenprotein也包括每个die einzelnen - Domänen，蛋白质酶学特征分析和deren结构分析以及DNA分析。齐尔·德·斯特拉斯，在机制和结构上的研究Verständnis质粒体复制分子Ebene与Zusammenwirken在质粒体复制上的研究Aktivitäten与多功能酶的研究。Dem Replikationsprotein kommt bei der质粒alen replikationeine zentrale bisher aber unvollständig beschriebene Rolle zu。Die geplanten arbeten werden unserere kennetnisse <e:1>她的dna复制和inbesonere deren起始<e:1> r Die Archaeen erweitern。Das质粒pRN1 ignet （<s:1> r - disease Untersuchungen als berschaubares model system）。

Das Replikationsprotein des Plasmides pRN1 ist ein multifunktionales Protein mit ATPase-, Primase- und DNA-Polymeraseaktivität. Es vereinigt damit in einer Peptidkette drei Aktivitäten, die für die Replikation erforderlich sind. Von besonderem Interesse ist ein Verständnis der koordinierten Interaktion dieser Aktivitäten.Die N-terminale Domäne des Proteins besitzt das aktive Zentrum für die DNA-Polymerisation wie durch Mutationsstudien gezeigt werden konnte. Die Kristallstruktur dieser Domäne wurde kürzlich von uns bestimmt. Die kristallisierte Domäne umfasst dabei mit 200 Aminosäuren weniger als ein Viertel des gesamten Proteins und hat nur noch eine eingeschränkte DNA-Polymeraseaktivität bzw. DNA-Bindungsaktivität. Insbesondere besitzt die kristallisierte Domäne keine Primaseaktivität mehr.In der C-terminalen Hälfte des Proteins befindet sich ein ATPase-/ Helikase-Domäne. Der Beitrag dieser Domäne für die plasmidale Replikation ist völlig unverstanden. Die Domäne besitzt Sequenzverwandtschaft zum essentiellen Protein D5 der Poxviren. Die Funktionsweise dieses Proteins ist ebenfalls nicht bekannt. Im beantragten Projekt sollen sowohl das Volllängenprotein als auch die einzelnen Domänen des Proteins enzymatisch charakterisiert werden und deren Struktur mit und ohne DNA bestimmt werden.Ziel des Antrages ist es, ein mechanistisches und strukturelles Verständnis der plasmidalen Replikation auf molekularer Ebene zu erlangen und das Zusammenwirken der einzelnen Aktivitäten dieses multifunktionellen Enzyms zu verstehen. Dem Replikationsprotein kommt bei der plasmidalen Replikation eine zentrale bisher aber unvollständig beschriebene Rolle zu. Die geplanten Arbeiten werden unsere Kenntnisse über die DNAReplikation und insbesondere deren Initiation für die Archaeen erweitern. Das Plasmid pRN1 eignet sich für diese Untersuchungen als überschaubares Modellsystem.