Molekulare und funktionelle Charakterisierung von Proteasedefekten, die mit neurodegenerativen Erkrankungen im Kindesalter assoziiert sind

从功能上看，溶酶体蛋白是一种神经退行性变的蛋白质，其特征是脂肪色素在溶酶体中。结果神经元性脑脊液脂肪变性(NCL)。BIM Menschen führen Defekte der TriPeptidyl-Peptidase I(TPP-I)：von cathepsin D(CatD)zu einem fortschreitenden bereits im KleinkindesAlter Beginnnenden Verlust der Motorischen and Kognitiven Fähigkeiten Sowie der Sehkraft.我是Tiermodell führen zusätzlich zum TPP-I-oder CatD-Defekt ein Kombinierter Verlust von cathepsin B and L Sowie ein Ausfall von cathepsin F zu einer nCL-ähnlichen Erkrankung。Allen NCL-Formen Gomeinsam是选择性的Untergang神经元师Zellen and Retinaler Rezeptorzellen，der sich ALS kortikale and erebelläre Hirnatrophie Sowie Rinale Degrading表现。这是一种普遍存在的神经退行性疾病，是一种功能性疾病。我是一名特殊的神经退行性机械师，他说这是一种很难解决的问题。NCL-Erkrankung assozierte mutante Proteine Sollen exmiert and Ihre vollständigen on parellen Funktionsverluste Charakterisiert是一种新的蛋白水解酶。为保护环境而努力，为的是保护环境和保护环境。Schlie？lich Sollen Molekulare Interaktions的合作伙伴von TPP-I和Catd一直在进行大量的光谱分析von Co-Affinitäts-Gereinigen Proteinen身份识别。这是一种有效的识别方法和免疫手套的方法。Zur Klärung möglicher Interaktionen to der Synergisscher Effekte von TPP-I and CatD Sollen cln2+/-Mäuse MIT ctsd+/-Mäusen gekreuzt we den and die Auswirkungen auf Krankheitsverlaf andÜberlebenszeit in den kombinierten Mausmodellen erforscht den.

Der Funktionsausfall unterschiedlicher lysosomaler Proteasen kann zu einer Neurodegeneration des Gehirns führen und mit der Akkumulation von charakteristischen Lipopigmenteinschlüssen in den Lysosomen einhergehen. Die hieraus resultierenden Erkrankungen werden zu den neuronalen Ceroid-Lipofuszinosen (NCL) gezählt. Beim Menschen führen Defekte der Tripeptidyl-Peptidase I (TPP-I) oder von Cathepsin D (CatD) zu einem fortschreitenden bereits im Kleinkindesalter beginnenden Verlust der motorischen und kognitiven Fähigkeiten sowie der Sehkraft. Im Tiermodell führen zusätzlich zum TPP-I- oder CatD-Defekt ein kombinierter Verlust von Cathepsin B und L sowie ein Ausfall von Cathepsin F zu einer NCL-ähnlichen Erkrankung. Allen NCL-Formen gemeinsam ist der selektive Untergang neuronaler Zellen und retinaler Rezeptorzellen, der sich als kortikale und cerebelläre Hirnatrophie sowie retinale Degeneration manifestiert. Dabei ist bisher nicht verstanden, warum der Funktionsausfall ubiquitär exprimierter Proteasen zu einem spezifisch neurodegenerativen Krankheitsbild führt. Im beantragten Projekt sollen die spezifisch neurodegenerativen Mechanismen, die aus einer Protease-Defizienz resultieren, untersucht werden. Neu entdeckte Protease-Mutanten sowie andere mit einer NCL-Erkrankung assoziierte mutante Proteine sollen exprimiert und ihre vollständigen oder partiellen Funktionsverluste charakterisiert werden. Weiterhin soll die Wirkung der Protease-Defizienz auf grundlegende zelluläre Vorgänge wie Teilungsrate, Energiehaushalt und Apoptoserate ermittelt werden. Schließlich sollen molekulare Interaktionspartner von TPP-I und CatD durch massenspektrometrische Analysen von Co-Affinitäts-gereinigten Proteinen identifiziert werden. Die Validität der identifizierten Interaktionen soll durch ergänzende Methoden wie Immunpräzipitation und Kolokalisation mittels Immunofluoreszenz-Mikroskopie belegt werden. Zur Klärung möglicher Interaktionen oder synergistischer Effekte von TPP-I und CatD sollen cln2 +/- Mäuse mit ctsd +/- Mäusen gekreuzt werden und die Auswirkungen auf Krankheitsverlauf und Überlebenszeit in den kombinierten Mausmodellen erforscht werden.