STUDY OF DIFFERENTIAL ACTIVITY OF AN ANTISENSE OLIGOMER AGAINST HIV-1

1989年，我们报道了一种抗核酸硫代磷酸酯 具有针对rev基因的反义构建体的寡脱氧核苷酸 （alpha-rev）在抑制HIV-1（IIIB）的表达方面具有活性， 慢性感染的H9细胞（Matsukura等，Proc. Natl. Acad. sci. 美国，86：4244 - 4248，1989）。 在目前的研究中，我们问， alpha-rev可以在多种病毒中发挥相当的抗病毒活性。 使用p24 Gag蛋白生产的慢性感染靶细胞系 作为一个终点。 当H9细胞稳定感染9种不同的 HIV-1-毒株（3种实验室毒株：HIV-1（IIIB）、HIV-1MN、HIV-1RF; 6种 临床分离株：HIV-1ERS（101）、HIV-1ERS（201前）、HIV-1ERS（201后）， HIV-1ERS（206）、HIV-1（018pre）、HIV-1（018post）、alpha-rev可提供一个 显著抑制（等于或大于60%抑制） 仅表达三种病毒株，HIV-1（IIIB），HIV-1（IIIB）， 1（201pre）和HIV-1（018post）。 当6种不同的细胞系（H9，CEM， HUT 102、MOLT 4、U937和G11）稳定感染HIV-1（IIIB）， HIV-1（IIIB）仅在以下情况下对α-rev抑制敏感： H9细胞和CEM细胞。 的摄取和细胞内定位 在每个细胞系中荧光素标记的α-rev与 HIV-1对寡聚体的敏感性。 α-rev 在每个细胞系中的细胞内降解也未显示可检测的 相关性 在每个细胞系中表达的rev转录物水平 似乎与病毒的易感性无关， α-转速

In 1989, we reported that a nucleic acid-resistant phosphorothioate oligodeoxynucleotide with an antisense construct against the rev gene (alpha-rev) was active in suppressing the expression of HIV-1(IIIB) in chronically infected H9 cells (Matsukura et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 86:4244-4248, 1989). In the present study, we asked whether this alpha-rev could exert comparable antiviral activity in a variety of chronically infected target cell lines using p24 Gag protein production as an endpoint. When H9 cells were stably infected with 9 different HIV-1-strains (3 laboratory strains: HIV-1(IIIB), HIV-1MN, HIV-1RF; 6 clinical isolates: HIV-1ERS(101), HIV-1ERS(201pre), HIV-1ERS(201post), HIV-1ERS(206), HIV-1(018pre), HIV-1(018post), alpha-rev could provide a substantial suppression (equal to or greater than 60% suppression) in the expression of only three of the virus strains, HIV-1(IIIB), HIV- 1(201pre), and HIV-1(018post). When 6 different cell lines (H9, CEM, HUT102, MOLT4, U937, and G11) were stably infected with HIV-1(IIIB), HIV-1(IIIB) was sensitive to alpha-rev suppression only when harbored in H9 cells and CEM cells. The uptake and intracellular localization of fluorescein-labeled alpha-rev in each cell line did not correlate with the sensitivity of HIV-1 to the oligomer. The rates by which alpha-rev degraded intracellularly in each cell line also did not show detectable correlation. Levels of rev transcripts expressed in each cell line did not appear to correlate with the susceptibility of the virus to alpha-rev.