Chitosane et streptomyces: régulation transcriptionnelle et diversité enzymatique

壳聚糖是甲壳类动物甲壳部分工业生产的一种阳离子多糖。Il possède de nombreuses applications en tant que biomatériau，agent phytoprotecteur ou produit naturel contributant à la baisse du taux de cholestérol. Plusieurs de ces propriététés dependent de son poids moléculaire -whi peut être aisément controlôlé par hydrolyse enzymatique à l'aide de chitosanases.我们的实验室对链霉菌产生的壳聚糖酶的认识有着重要的贡献。为了我们今后的工作，我们提出了三个主要研究方向，即扩大对壳聚糖酶的认识，以及微生物与壳聚糖的生理关系--不要把这一点放在生产和利用的基础上。本文通过对链霉菌壳聚糖酶基因转录调控机制的研究，探讨了基因转录调控机制与基因调控基序的相互作用。这种研究在体外迈斯也在体内进行，因为许多突变体接触到这种相互作用。第二部分阐明了壳聚糖降解产物在细胞内的转运机制，并鉴定了细胞内负责水解单体壳聚糖的酶。Le troisième volet se observe sur la diversité enzymatique et physiologique des chitosanases. Il vise à comprendre pourquoi certain streptomycètes possèdent jusqu'à cinq chitosanases - en identifiant les différences dans l 'action de ces enzymes et dans la transcription de leurs gènes respectifs.同时也检测了壳聚糖酶在其他底物上的活性，如脱乙酰肽聚糖或一种多聚物混合物：壳聚糖-葡聚糖。这些研究最初倾向于我们对这些酶、调节和生理作用的认识。

Le chitosane est un polysaccharide cationique produit à l'échelle industrielle à partir de carapaces de crustacés. Il possède de nombreuses applications en tant que biomatériau, agent phytoprotecteur ou produit naturel contribuant à la baisse du taux de cholestérol. Plusieurs de ces propriétés dépendent de son poids moléculaire - qui peut être aisément contrôlé par hydrolyse enzymatique à l'aide de chitosanases. Notre laboratoire a apporté des contributions significatives aux connaissances sur les chitosanases, surtout celles produites par les streptomycètes. Pour nos travaux futurs, nous proposons trois grands axes de recherche visant à élargir les connaissances sur les chitosanases mais aussi sur les rapports physiologiques des microorganismes avec le chitosane - dont la présence va s'accentuer dans l'environnement en fonction de la croissance de sa production et de son utilisation. Nous proposons d'étudier la régulation transcriptionnelle d'un gène de chitosanase de Streptomyces par le biais d'une analyse fine de l'interaction du régulateur transcriptionnel avec le motif régulateur de ce gène. Cette étude sera menée in vitro mais aussi in vivo en construisant divers mutants touchant cette interaction. Le second volet vise à élucider le mécanisme de transport des produits de dégradation du chitosane (oligosaccharides) dans la cellule et à identifier les enzymes intracellulaires responsables de l'hydrolyse de ces oligosaccharides en monomères. Le troisième volet se penche sur la diversité enzymatique et physiologique des chitosanases. Il vise à comprendre pourquoi certains streptomycètes possèdent jusqu'à cinq chitosanases - en identifiant les différences dans l'action de ces enzymes et dans la transcription de leurs gènes respectifs. On y examinera aussi l'activité de ces chitosanases face à des substrats autres que le chitosane - comme le peptidoglycane désacétylé ou un polymère mixte: la chitosane-glucane. Ces recherches originales étendront nos connaissances sur ces enzymes, leur régulation et leur rôle physiologique.