Vergleichende funktionelle Analyse der evolutionären Konservierung von Fibroblasten-Wachstumsfaktor-Rezeptoren bei Hydra und Drosophila

水螅和果蝇成纤维细胞生长因子受体进化保守性的比较功能分析

基本信息

项目摘要

Fibroblasten-Wachstumsfaktoren (FGF) und ihre Rezeptoren (FGFR) fungieren in der Entwicklung aller bislang untersuchten Tiere als essentielle Steuerelemente der Morphogenese. Wir haben den bislang ältesten bekannten FGFR Verwandten (Kringelchen) aus Hydra isoliert. Erste Versuche mit dem Ziel, die funktioneile Konservierung von Kringelchen zu untersuchen, zeigen, dass das Hydra Protein unter Kontrolle eines fvw sf-Promoters effizient im Mesoderm von Drosophila exprimiert wird und in der Lage ist, eine Mutante des endogenen FGFR Heartless (Htl) in frühen Stadien zu retten. Heartless ist bei Drosophila essentiell für die frühe mesodermale Zellwanderung und damit nachfolgend die Ausbildung der visceralen und somatischen Muskulatur, sowie des Herzens. Wir wollen zunächst eine detaillierte morphologische Analyse der geretteten Mutante durchführen und durch Einsatz eines /jeart/ess-Treiberstamms versuchen, auch den späten Phänotyp zu retten. Parallel dazu soll untersucht werden, ob Kringelchen auch den zweiten Drosop/7//a-FGFR, Breathless, ersetzen kann, der die Verzweigungsmorphogenese des ekto-mesodermalen Tracheensystems steuert. Ergänzt durch FGF-Bindungsstudien an Hydra und Zellkulturen, Inhibitionsexperimente und Phosphorylierungsanalysen an immunpräzipitiertem Kringelchen erwarten wir neue Erkenntnisse zur evolutionären Konservierung der FGFR.
成纤维细胞因子(FGF)和真菌生长因子(FGFR)在胚胎发育中的作用是形态发生的基本要素。我们已经从Hydra isoliert获得了FGFR Verwandten(Kringelchen)的第二项测试。第一个实验是通过对Kringelchen功能的研究,发现Hydra蛋白在控制果蝇中胚层的sf-Promoters中发挥作用,而在拉格的作用下,内源性FGFR Heartless(Htl)在运动场发生突变。无情是果蝇对中胚层动物的基本要求,也是对内脏和躯体发育的促进。我们将详细分析通过基因突变和通过基因突变产生的突变体的形态学特征,并对突变体的形态学特征进行分析。平行的实验韦尔登也证实了两种Drosop/7//a-FGFR,Breathless,Ersetzen kann,是外中胚层气管系统的正常形态发生。通过对Hydra和Zellkulturen的FGF-Bindungsstudien、Inhibitionsexperimente和Phosphorylierungsanalysen以及免疫präzipitiertem Kringelchen的研究,我们发现了FGFR进化的新证据。

项目成果

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