Molekulare Mechanismen der Interaktion des Tumorsuppressors Merlin mit Rho-GTPasen / Aufklärung von Neurofibromatose (NF-)relevanten Signaltransduktionswegen und Biomarkern mit Protein Mikroarrays

project jektteil Gierschik: rho - gtpasensind intrazelluläre Schaltproteine, die als Signalvermittler extrazelluläre Informationen integrieen und diese in örtlich and zeitlich koordinierte Änderungen der subzellulären lockalisation und/oder Aktivität nachgeschalteter signalbertragungsproteine bersetzen。肿瘤抑制蛋白（Tumorsuppressorprotein Merlin, mitglyder protein -4.1家族，interagerert and mehren Stellen）可调控Rho-GTPasen intrazellulären信号调控。2型神经纤维瘤，2型神经纤维瘤，2型神经纤维瘤，2型神经纤维瘤，2型神经纤维瘤，2型神经纤维瘤，2型神经纤维瘤。分子间相互作用的机理与机理。在此基础上，系统分析了Merlin-1和merlin -2与Mitgliedern -4.1蛋白家族（Ezrin， Radixin和Moesin）与Rho-GTPasen和oder ihren调控因子之间的相互作用。Zentrale hypothesis des Vorhabens ist - ine indirect, Interaktion mit den anderen Protein-4.1-Familienmitgliedern vermittelte， direct Aktivierung des rho - gdp - dis解离抑制剂Rho-GDI durch Merlin。本研究主要研究了植物的营养成分、营养成分、营养成分、营养成分、营养成分、营养成分、营养成分、营养成分等。肿瘤抑制因子的相互作用机制，肿瘤抑制因子的相互作用机制，肿瘤抑制因子的相互作用机制，肿瘤抑制因子的相互作用机制，肿瘤抑制因子的相互作用机制，肿瘤抑制因子的相互作用机制，肿瘤抑制因子的相互作用机制，肿瘤抑制因子的相互作用机制，肿瘤抑制因子的相互作用机制，肿瘤抑制因子的相互作用机制。Projektteil Joos/Deißler:Im Zentralprojekt Protein microarrays and die in Rahmen dieses Verbunds zur verfgung stehende, einzigartige Sammlung primärer Zellkulturen, schwanmen and meningemen von Neurofibromatose Typ2 （NF2）患者的蛋白质表达分析[j]。蛋白质微阵列技术（insbesonere werden vergleichende Untersuchungen gemeinsamer signalmolek）；[3][1][2][1][2][1][2]。Im weiteren ermöglicht der Zugang der Verbundpartner zu patientenensen verschiedenster klinisch sehr gut charterisierter nf - patientdie Initiation einer teilweise empirischen sowie hypothesis gesten zten等，即NF-spezifischen血清生物标志物。Zur Identifizierung der Biomarker kommt dabei die am EOL and NMI Reutlingen etablierte Bead-basierte luminex - technology zum Einsatz，利用基因反向蛋白微阵列（planare Wellenleiter technology, Zeptosens）对Zur蛋白表达进行分析primären Zellkulturen genutzt werden。北京科技平台ermöglichen einefokussierte蛋白质组分析网站Sensitivität和Spezifität。Planare为每一颗微珠基芯片搭建的平台，用于研究蛋白质微孔芯片Möglichkeit，用于研究蛋白质微孔芯片。利用高密度ProtoArrays （Proteinarrays von rekombinanten humanen Proteinen, Invitrogen）和Einsatz kommen，研究了nf -相关重组蛋白和蛋白质复合物在腹腔内的筛选。

Projektteil Gierschik:Rho-GTPasen sind intrazelluläre Schaltproteine, die als Signalvermittler extrazelluläre Informationen integrieren und diese in örtlich und zeitlich koordinierte Änderungen der subzellulären Lokalisation und/oder Aktivität nachgeschalteter Signalübertragungsproteine übersetzen. Das Tumorsuppressorprotein Merlin, ein Mitglied der Protein-4.1-Familie, interagiert an mehreren Stellen mit der durch Rho-GTPasen regulierten intrazellulären Signalverarbeitung. Es ist sehr wahrscheinlich, dass ein Verlust dieser Interaktionen in Merlin-defizienten Zellen an der Entstehung von Schwannomen und Meningeomen bei Patienten mit Neurofibromatose Typ 2 beteiligt ist. Die molekularen Mechanismen dieser Interaktionen sind jedoch bis heute nicht verstanden. Das hier vorgeschlagene Arbeitsprogramm sieht eine systematische Analyse der Interaktion von Merlin-1 und -2 und anderen Mitgliedern der Protein-4.1-Familie (Ezrin, Radixin und Moesin) mit Rho-GTPasen und/oder ihren Regulatoren vor. Zentrale Hypothese des Vorhabens ist eine indirekte, durch Interaktion mit den anderen Protein-4.1-Familienmitgliedern vermittelte, oder direkte Aktivierung des Rho-GDP-Dissoziationsinhibitors Rho-GDI durch Merlin. Die Untersuchungen sollen an intakten kultivierten Zellen und im zellfreien System an gereinigten Proteinen nach deren funktioneller Rekonstitution durchgeführt werden. Die angestrebten Ergebnisse sollen dazu beitragen, die molekularen Mechanismen der Interaktionen des Tumorsuppressors Merlin mit signalübertragenden Rho-GTPasen und die Bedeutung eines Verlustes dieser Interaktionen für die Entstehung von Tumoren bei Neurofibromatose Typ 2 besser zu verstehen. Projektteil Joos/Deißler:Im Zentralprojekt Protein Mikroarrays wird die im Rahmen dieses Verbunds zur Verfügung stehende, einzigartige Sammlung primärer Zellkulturen aus Schwannomen und Meningeomen von Neurofibromatose Typ2 (NF2) Patienten auf Protein Expressionsmuster analysiert werden. Insbesondere werden vergleichende Untersuchungen gemeinsamer Signalmoleküle mittels Protein Mikroarraytechnologie durchgeführt. Die gewonnenen Daten werden dann zur Identifizierung eines gemeinsamen Pathomechanismus genutzt. Im weiteren ermöglicht der Zugang der Verbundpartner zu Patientenseren verschiedenster klinisch sehr gut charakterisierter NF-Patienten die Initiation einer teilweise empirischen sowie Hypothesen gestützten Suche nach NF-spezifischen Serumbiomarkern. Zur Identifizierung der Biomarker kommt dabei die am EOL und NMI Reutlingen etablierte Bead-basierte Luminex-Technologie zum Einsatz, wohingegen reverse Protein Mikroarrays (planare Wellenleiter Technologie, Zeptosens) zur Proteinexpressionsanalyse der primären Zellkulturen genutzt werden. Beide Technologieplattformen ermöglichen eine fokussierte Proteom-Analyse mit hoher Sensitivität und Spezifität. Planare wie auch Bead-basierte Mikroarray Plattformen bieten zudem die Möglichkeit, Studien von Protein Wechselwirkungen zu betreiben. Hierfür sollen NF-relevante rekombinante Proteine und Proteinkomplexe in einer ersten ¿screening Runde auf high density ProtoArrays (Proteinarrays von rekombinanten humanen Proteinen, Invitrogen) zum Einsatz kommen.