Molekulare Mechanismen der Interaktion des Tumorsuppressors Merlin mit Rho-GTPasen / Aufklärung von Neurofibromatose (NF-)relevanten Signaltransduktionswegen und Biomarkern mit Protein Mikroarrays

肿瘤抑制因子 Merlin 与 Rho-GTP 酶相互作用的分子机制/利用蛋白质微阵列阐明神经纤维瘤病 (NF-) 相关信号转导途径和生物标志物

• 批准号: 16748334
• 负责人: Professor Dr. Peter Gierschik
• 金额: --
• 依托单位: Arbeitsgruppe Molekulare Onkologie (aufgelöst)
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2004-12-31 至 2008-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/16748334?language=en
• 关键词: Molekulare; Mechanismen; der; Interaktion; des

Projektteil Gierschik:Rho-GTPasen sind intrazelluläre Schaltproteine, die als Signalvermittler extrazelluläre Informationen integrieren und diese in örtlich und zeitlich koordinierte Änderungen der subzellulären Lokalisation und/oder Aktivität nachgeschalteter Signalübertragungsproteine übersetzen. Das Tumorsuppressorprotein Merlin, ein Mitglied der Protein-4.1-Familie, interagiert an mehreren Stellen mit der durch Rho-GTPasen regulierten intrazellulären Signalverarbeitung. Es ist sehr wahrscheinlich, dass ein Verlust dieser Interaktionen in Merlin-defizienten Zellen an der Entstehung von Schwannomen und Meningeomen bei Patienten mit Neurofibromatose Typ 2 beteiligt ist. Die molekularen Mechanismen dieser Interaktionen sind jedoch bis heute nicht verstanden. Das hier vorgeschlagene Arbeitsprogramm sieht eine systematische Analyse der Interaktion von Merlin-1 und -2 und anderen Mitgliedern der Protein-4.1-Familie (Ezrin, Radixin und Moesin) mit Rho-GTPasen und/oder ihren Regulatoren vor. Zentrale Hypothese des Vorhabens ist eine indirekte, durch Interaktion mit den anderen Protein-4.1-Familienmitgliedern vermittelte, oder direkte Aktivierung des Rho-GDP-Dissoziationsinhibitors Rho-GDI durch Merlin. Die Untersuchungen sollen an intakten kultivierten Zellen und im zellfreien System an gereinigten Proteinen nach deren funktioneller Rekonstitution durchgeführt werden. Die angestrebten Ergebnisse sollen dazu beitragen, die molekularen Mechanismen der Interaktionen des Tumorsuppressors Merlin mit signalübertragenden Rho-GTPasen und die Bedeutung eines Verlustes dieser Interaktionen für die Entstehung von Tumoren bei Neurofibromatose Typ 2 besser zu verstehen. Projektteil Joos/Deißler:Im Zentralprojekt Protein Mikroarrays wird die im Rahmen dieses Verbunds zur Verfügung stehende, einzigartige Sammlung primärer Zellkulturen aus Schwannomen und Meningeomen von Neurofibromatose Typ2 (NF2) Patienten auf Protein Expressionsmuster analysiert werden. Insbesondere werden vergleichende Untersuchungen gemeinsamer Signalmoleküle mittels Protein Mikroarraytechnologie durchgeführt. Die gewonnenen Daten werden dann zur Identifizierung eines gemeinsamen Pathomechanismus genutzt. Im weiteren ermöglicht der Zugang der Verbundpartner zu Patientenseren verschiedenster klinisch sehr gut charakterisierter NF-Patienten die Initiation einer teilweise empirischen sowie Hypothesen gestützten Suche nach NF-spezifischen Serumbiomarkern. Zur Identifizierung der Biomarker kommt dabei die am EOL und NMI Reutlingen etablierte Bead-basierte Luminex-Technologie zum Einsatz, wohingegen reverse Protein Mikroarrays (planare Wellenleiter Technologie, Zeptosens) zur Proteinexpressionsanalyse der primären Zellkulturen genutzt werden. Beide Technologieplattformen ermöglichen eine fokussierte Proteom-Analyse mit hoher Sensitivität und Spezifität. Planare wie auch Bead-basierte Mikroarray Plattformen bieten zudem die Möglichkeit, Studien von Protein Wechselwirkungen zu betreiben. Hierfür sollen NF-relevante rekombinante Proteine und Proteinkomplexe in einer ersten ¿screening Runde auf high density ProtoArrays (Proteinarrays von rekombinanten humanen Proteinen, Invitrogen) zum Einsatz kommen.

Projektteil Gierplek：Rho-GTPasen sind intrazelluläre Schaltproteine，die als Signalvermittler extrazelluläre Informationen integrieren und diese in örtlich und zeitlich koordinierte Änderungen der subzellulären Lokalisation und/oder Aktivität nachgeschalteter Signalübertragungsproteine übersetzen.肿瘤抑制蛋白Merlin是一种蛋白质-4.1-家族的蛋白质，通过Rho-GTP酶调节细胞内信号传导，与许多恒星相互作用。这是一个很好的例子，因为在患有2型神经纤维瘤的患者中，Merlin-defizienten Zellen与神经鞘和脑膜的相互作用是非常重要的。国际货币基金组织的分子机制今天还不稳定。Das hier vorgeschlagene Arbeitsprogramm sieht eine systematische Analyse der Interaktion von Merlin-1 und -2 und anderen Mitgliedern der Protein-4.1-Familie（Ezrin，Radixin und Moesin）mit Rho-GTPasen und/oder ihren Regulatoren vor.中心假说是一个独立的假说，通过与其他家族蛋白4.1的相互作用，或通过Merlin直接激活Rho-GDP-Dissoziationinhibitors Rho-GDI。该研究解决了一个综合性的多学科Zellen和zellfreien系统，并通过韦尔登的功能性重构来指导蛋白质。Merlin与Rho-GTP酶信号相互作用的分子机制和相互作用对2型神经纤维瘤患者肿瘤发生的影响是非常重要的。Joos/Deißler项目：蛋白质微阵列的中心项目将在Rahmen dieses Verbunds中进行验证，一个来自神经纤维瘤2型（NF 2）患者的神经细胞培养物和脑膜的样本将用于蛋白质表达分析韦尔登。Insbesondere韦尔登vergleichende Untersuchungen gemeinsamer Signalmoleküle mittels Protein Mikroarraytechnologie durchgeführt.这些数据将用于确定一种常见的病理机制。通过与患者的合作伙伴共同研究，可以发现NF-患者在启动NF-特异性血清学检查时具有良好的特征。为了在EOL和NMI罗伊特林根中鉴定生物标志物，建立了基于微珠的发光技术，使用反向蛋白微阵列（planare Wellenleiter Technologie，Zeptosens）分析了韦尔登原代细胞培养物的蛋白表达。Beide技术平台提供了一种灵敏度和特异性更高的聚焦蛋白质分析。Planare wie auch Bead-basierte Mikroarray Plattformen bieten zudem die Möglichkeit，purifen von Protein Wechselenkungen zu betreiben.在高密度ProtoArrays（Proteinarrays von rekombinanten humanen Proteinen，Invitrogen）上进行首次筛选时，需要解决NF相关的重组蛋白质和蛋白质复合物。